蜂膠對感染根管消毒功效的實驗和臨床研究.pdf

1、背景：牙齒根尖周炎是由根管內(nèi)微生物感染引起的。微生物因素在根尖周炎的發(fā)生、發(fā)展和持續(xù)存在中起著非常重要的作用。厭氧菌已被大多數(shù)學者公認為是牙髓、根尖周病的優(yōu)勢菌，約占其細菌總數(shù)的2/3以上。臨床治療中針對感染根管最常用的消毒方法是藥物消毒。目前常用的根管消毒藥物有甲醛甲酚(formcresol，F(xiàn)C)、樟腦苯酚(camphorated phenol，CP)和氫氧化鈣(Ca(OH)2)等。近年來，國內(nèi)外研究表明，F(xiàn)C、CP等都有較強的細胞

2、毒性，作為半抗原可引起機體免疫損害，同時FC有較強的刺激性和致癌的可能性；氫氧化鈣不能有效消除感染根管內(nèi)的所有微生物，尤其對頑固性根尖周炎或根管治療術失敗后患牙中的病原菌。因此尋求一種消毒力強、副作用小的根管消毒藥物一直是國內(nèi)外學者所關注的研究課題。 近年來蜂膠用于口腔疾病的治療已有相關報道。據(jù)文獻報道蜂膠使用安全，對人體無毒、無刺激性、無致癌性，不產(chǎn)生耐藥性等。盡管國內(nèi)外學者對蜂膠做了大量研究，但是目前關于國產(chǎn)蜂膠用于根管消毒

3、方面的基礎及臨床等相關研究報道還較少，所以本課題將對這些方向進行些研究。目的：本課題擬研究國產(chǎn)水溶性蜂膠對感染根管內(nèi)常見菌：中間普氏菌、具核梭桿菌、中間普氏菌及具核梭桿菌的混合菌的抑菌活性；對人牙周膜成纖維細胞的細胞毒性。探討蜂膠用于感染根管消毒的有效性和安全性，同時選擇適宜濃度的蜂膠進行臨床試驗，獲取臨床療效資料，為臨床應用提供一定的理論依據(jù)。 材料與方法： 1.蜂膠對中間普氏菌、具核梭桿菌、中間普氏菌及具核梭桿菌的混

4、合菌的體外抑菌實驗。用BHI+Hemin液體培養(yǎng)基將蜂膠水溶液按對倍稀釋原理，配成5種濃度的藥液，依次加入BHI培養(yǎng)基中，制備成含藥物瓊脂平板，在厭氧條件下接種并培養(yǎng)中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌48小時，檢測瓊脂平板上細菌的生長情況，無細菌生長的最低藥物濃度為蜂膠對兩單種菌及混合菌的最低殺菌濃度(MBC)。 2.蜂膠對人牙周膜成纖維細胞的細胞毒性作用。采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法，以氫氧化鈣為對照組，評價0.6％、0.

5、4％、0.2％、0.1％的蜂膠水溶液對人牙周膜成纖維細胞相對增殖率的影響，并用五級毒性分類法評級。 3.采用完全隨機對照的方法，選擇慢性根尖周炎門診患者72名，隨機分為三組(兩組為實驗組，一組為對照組)。選擇單根管前牙或雙尖牙，常規(guī)根管預備后，實驗組分別封入0.1％的蜂膠和0.4％的蜂膠，對照組封入氫氧化鈣糊劑， 1周后復查。分別記錄三組病例臨床癥狀的改善情況及復診次數(shù)；分別在根管預備前、根管預備后、封藥后用紙尖取樣并接種在BH

6、I血瓊脂培養(yǎng)基表面，厭氧罐培養(yǎng)48 h。觀察培養(yǎng)基上細菌菌落的形態(tài)，選擇培養(yǎng)基上的優(yōu)勢菌，依據(jù)Bergey’S細菌學鑒定手冊，作革蘭氏染色進行初步鑒定分類，并記錄相應菌落數(shù)量。通過所得數(shù)據(jù)評價蜂膠用于感染根管消毒的臨床效果。 結果： 1.蜂膠水溶液對中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌均有良好的抑菌作用，其MBC分別為0.025％、0.05％和 0.05％，抑制作用隨蜂膠濃度的升高而增強。 2.在不同濃度的蜂膠及

7、氫氧化鈣溶液的作用下，細胞相對增殖率均有改變，且濃度越高，細胞毒性越大，但其細胞毒性均在2級以下，屬于輕微毒性。其中0.1％的蜂膠與1％的氫氧化鈣細胞毒性最弱，與其他各濃度組間存在顯著性差異(P＜0.05)。 3.0.1％蜂膠、0.4％蜂膠、氫氧化鈣糊劑均能夠有效改善根尖周炎患者臨床癥狀，從疼痛、叩痛、紅腫、竇道等的消除和緩解方面統(tǒng)計，單因素各組組間有顯著性差異(P＜0.05)；組間兩兩比較無顯著性差異(P＞0.05)。從封藥次

8、數(shù)上統(tǒng)計，0.4％蜂膠的改善效果好于其它兩組，兩組實驗組之間有顯著性差異(P＜0.05)，0.4％蜂膠和對照組之間有顯著性差異(P＜0.05)，0.1％蜂膠和對照組之間無顯著性差異(P＞0.05)。細菌取樣培養(yǎng)結果顯示0.1％蜂膠、0.4％蜂膠、氫氧化鈣各組在根管預備前后及封藥后根管內(nèi)的細菌數(shù)量均有明顯下降，對各組分別進行組間方差分析，組間差異均有顯著性(P＜0.05)，組間兩兩比較沒有顯著性差異(P＞0.05)。 結論：

9、 1.蜂膠水溶液對中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌均有良好的抑菌作用，提示蜂膠對口腔厭氧菌良好的抑菌活性。 2.蜂膠與氫氧化鈣均對人牙周膜成纖維細胞的毒性較小，其中0.1％的蜂膠與1％的氫氧化鈣的毒性最弱。 3.0.1％蜂膠、0.4％蜂膠和氫氧化鈣糊劑均能夠有效改善根尖周炎患者的臨床癥狀；通過細菌培養(yǎng)、涂片鏡檢顯示能有效殺滅感染根管內(nèi)的致病菌。統(tǒng)計結果提示使用0.4％蜂膠用于根管消毒，具有較好的臨床療效及可操作性。