NF-κB及其調(diào)控產(chǎn)物在小鼠EAH中的表達及意義.pdf

1、自身免疫性肝炎是一種病因未明的慢性進行性炎癥性肝病，女性多見，免疫抑制劑通常有效。組織學表現(xiàn)為匯管區(qū)大量淋巴細胞浸潤，血清學表現(xiàn)為非肝特異性循環(huán)自身抗體的出現(xiàn)，轉(zhuǎn)氨酶升高，γ球蛋白或IgG升高。但其發(fā)病機制目前尚不十分清楚。 近年來研究發(fā)現(xiàn)，通過免疫手段，用C57BL/6近交系小鼠肝臟提取物與弗氏完全佐劑混合作為抗原，對同種系小鼠腹腔注射建立的實驗性自身免疫性肝炎(EAH)動物模型，其病變特點與人類慢性肝炎非常接近，認為是研究人

2、類病毒性肝炎和自身免疫性肝炎比較理想的模型。 核因子-κB(NF-κB)作為重要的細胞因子，在許多肝臟疾病的肝損傷過程中起著重要的作用。研究表明，NF-κB能調(diào)控細胞間粘附分子-1(ICAM-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)等基因的轉(zhuǎn)錄表達。 NF-κB是否參與AIH的免疫性肝損傷過程，目前尚無相關(guān)報道，但根據(jù)其調(diào)控產(chǎn)物在AIH中的作用，推測NF-κB可能在AIH發(fā)病中起重大作用。

3、 目的：本實驗通過建立EAH模型，探討NF-κB及其調(diào)控產(chǎn)物ICAM-1、TNF-α、IL-6在EAH中的表達和在肝損傷中的可能作用。 方法：40只雄性4周齡C57BL/6小鼠，造模時體重為20.32±0.86g，采用同種系小鼠肝臟提取物即肝抗原S-100與等體積弗氏完全佐劑混勻后，予小鼠腹腔注射，建立實驗性自身免疫性肝炎模型。小鼠隨機分為兩組，即對照組和模型組。對照組小鼠不做任何處理，普通飼養(yǎng)，模型組于每周腹腔注射1次S-10

4、0與等體積弗氏完全佐劑混勻物1ml，共注射4次。于第28天處死所有動物，分離血清-20℃保存以各測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、白蛋白(A)、球蛋白(G)；取部分肝左葉予10％甲醛固定4h以上，脫水、石蠟包埋，用于HE染色和NF-κB、ICAM-1、TNF-α、IL-6免疫組織化學染色。HE結(jié)果用光學顯微鏡觀察，免疫組織化學染色結(jié)果以陽性細胞數(shù)占總細胞數(shù)的百分比表示。 所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差((x)

5、±s)表示，并應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進行處理，組間比較用Student'st檢驗，P＜0.05即認為有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論：(1)通過S-100與弗氏完全佐劑給予小鼠腹腔注射后，成功建立了實驗性自身免疫性肝炎動物模型。(2)NF-κB及其調(diào)控的ICAM-1、TNF-α、IL-6在EAH模型中均有表達，提示NF-κB及其調(diào)控產(chǎn)物可能在EAH肝損傷的發(fā)病過程中起到一定的作用。(3)NF-κB通過調(diào)控ICAM-1、TNF-α、IL