高效降解棉酚菌株的分離、鑒定及其降解機(jī)理的研究.pdf

1、㈣咖㈣_J|||㈣J|l||川』l單位代碼10476l學(xué)號1404183017分類號Q933河南衙瓢大學(xué)碩士學(xué)位論文高效降解棉酚菌株的分離、鑒定及其降解機(jī)理的研究學(xué)科、專業(yè)研究方向申請學(xué)位類別申請人指導(dǎo)教師生物學(xué)微生物學(xué)理學(xué)碩士趙靜陳建軍副教授二。一七年五月摘要燦帥IIIIIlIlII圳圳llIlI㈣㈣mY3262009隨著21世紀(jì)的到來，人們逐漸注重營養(yǎng)的搭配，對奶、肉制品等食品的需求量與日俱增，從而對畜牧業(yè)的發(fā)展起到了一定的刺激作用

2、，畜牧業(yè)的發(fā)展蒸蒸日上，同時對飼料原料的需求也日益增加，促進(jìn)了飼料行業(yè)的發(fā)展。我國地大物博，棉籽粕資源十分豐富，其產(chǎn)量居世界首位。研究發(fā)現(xiàn)，棉籽粕中的蛋白質(zhì)含量較高，其粗蛋白含量可以達(dá)到40％以上，具有很高的開發(fā)、應(yīng)用價值。但因抗?fàn)I養(yǎng)因子棉酚的存在，極大地限制了棉籽粕的應(yīng)用，并且造成了資源的浪費(fèi)。由于棉籽粕蛋白質(zhì)含量高，價格低廉，因此尋找一種綠色可行的方法對棉籽粕進(jìn)行充分地利用，對解決我國蛋白資源嚴(yán)重短缺的問題將發(fā)揮巨大的作用。相比于傳

3、統(tǒng)的棉粕脫毒法，微生物發(fā)酵法是一種綠色新型的脫毒方法，該方法在脫毒的同時還可以提高棉粕的營養(yǎng)價值，增加適口性和采食量。本論文篩選到一株高效降解棉酚的菌株，通過微生物發(fā)酵法對棉粕進(jìn)行脫毒，并探究了微生物發(fā)酵棉粕工藝參數(shù)的最優(yōu)化條件，同時采用分子生物學(xué)的方法進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠(sDsPAGE)，并結(jié)合高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LCMS／MS)對微生物發(fā)酵棉粕脫毒機(jī)理進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下：1從新鄉(xiāng)周邊的棉花土壤地、棉花榨油廠分別取樣，以醋

4、酸棉酚為唯一碳源初篩得到48株菌株，經(jīng)由復(fù)篩分離純化得到了6株具有較強(qiáng)降解棉酚能力的菌株。通過形態(tài)學(xué)觀察并結(jié)合18SrDNA分子生物學(xué)鑒定，我們判斷出1號為黑曲霉(彳s妒叼f批聆咖r)，2號為黃益霉(么印g叼f，，“s伽y淞)，3號為產(chǎn)紫青霉(心，2ici，，f甜mp“印“加薩““瓏)，4號為土曲霉(彳印P叼i，，“sfe∥“s)，5號為青霉(心，zfcf脅“m印)，6號為釀酒酵母(勛c幽arD聊)，c鯽cgrPv括揚(yáng)e)，并將這些菌株