石油降解菌株的篩選、鑒定及其石油降解特性的初步研究.pdf

1、隨著現(xiàn)代石油工業(yè)的發(fā)展，石油的環(huán)境污染問題越來越突出，微生物修復技術被公認為是治理石油污染的較好方法，研究發(fā)現(xiàn)，獲得高效、廣譜、穩(wěn)定、適應性強的石油降解菌株以及配套治理工藝是利用該技術進行石油污染治理的關鍵。 本文從大港油田長期被石油污染的土壤和水體中采集樣品，對土壤中原油含量和三種主要微生物類群的數(shù)量進行測定；以原油為唯一碳源，通過直接分離和富集培養(yǎng)分離的方法進行石油降解菌株的篩選；通過形態(tài)觀察、生理生化試驗、16srDNA全

2、序列分析及Biolog方法對石油降解菌株進行初步鑒定；對影響降解菌株生長和降解效率的相關因素進行試驗，以確定各菌株在搖瓶中的最適生長和原油降解條件；完成石油降解復合菌群的組建，對影響復合系降解效率的因素進行試驗研究，通過室內(nèi)對模擬石油污染土壤的降解試驗評估復合系的應用效果。 試驗結(jié)果如下：1、石油污染對大港油田土壤中微生物群落的影響顯著，微生物數(shù)量的變化同原油含量有一定的相關性，由于石油污染，大港油田土壤中微生物數(shù)量普遍偏低，重

3、度污染區(qū)的微生物數(shù)量隨著含油量的增加而減少。 2、從大港油田石油污染樣品中分離得到16株能以原油為唯一碳源的菌株，通過篩選得到4株原油降解率超過60％的菌株，其中OD-5和OD-16對原油的降解率分別達到77.78％和74.89％，高于很多目前已報道的菌株。經(jīng)形態(tài)學觀察、生理生化試驗、16srDNA全序列分析和Biolog反應，將4株降解菌初步鑒定為：OD-5為Gordoniaamicalis，OD-7為Micrococcush

4、alobius，OD-15為Shewanellasp.，OD-16為Pseudomonassp.，目前對Gordoniaamicalis，Micrococcushalobius和Shewanellasp.作為石油降解菌的報道較少。這一結(jié)果為微生物降解石油提供了新的信息。 3、通過搖床試驗得出4株石油降解菌在搖瓶中的最佳生長和原油降解條件：初始pH為7～8，溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm，鹽濃度(NaCl)為1％，最適氮源為

5、NH4Cl，最適磷源為KH2PO4和K2HPO4的混合物(1∶2)。 4、通過菌株組合試驗，獲得一個降解效果較好的復合系ODC-4，7d，對濃度為500mg/Kg的原油的降解效率達到84.36％，該復合系在搖瓶中的最適降解條件為：初始pH為8～9，溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm，鹽濃度(NaCl)為1％，最適氮源為NH4Cl，最適磷源為KH2PO4和K2HPO4的混合物(1∶2)。原油的類型影響復合系的降解效率；原油濃度低

6、于2000mg/Kg時對復合系的降解效率影響不大，濃度超過2000mg/Kg后，降解效率受到一定影響，隨著原油濃度的增加，復合系的降解效率逐漸降低，當濃度達到10000mg/Kg時，原油的降解率為21.44％；不同的表面活性劑對復合系的降解率均有一定的促進作用，尤其是復合型表面活性劑的效果最明顯。ODC-4在室內(nèi)降解模擬石油污染土壤，15d，土壤中原油(500mg/10g)的降解率達到41.60％，28d，降解率提高到47.02％，表現(xiàn)