激光散斑成像結(jié)合光化學(xué)腦缺血模型及在相關(guān)藥物篩查中的應(yīng)用.pdf

1、目的：激光散斑成像是近年興起的一種活體成像技術(shù)，用于觀察活體組織內(nèi)的血流，而如何運(yùn)用于腦血管病的研究還存在醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化的實(shí)際困難。本論文采用激光散斑成像技術(shù)觀察小鼠腦血流量和腦血流改變情況下側(cè)支循環(huán)情況，結(jié)合小鼠的光化學(xué)腦缺血模型和標(biāo)準(zhǔn)化方法用于動(dòng)態(tài)、連續(xù)監(jiān)測(cè)缺血灶模型的信號(hào)改變規(guī)律。進(jìn)一步分析血流信號(hào)改變與腦組織病理變化相互關(guān)系，探索光化學(xué)模型的神經(jīng)血管的變化規(guī)律。以驗(yàn)證光化學(xué)腦缺血模型激光散斑成像成為一種高效的藥物篩查方法的可能性。

2、r>　　方法：利用激光散斑成像系統(tǒng)觀察C57/BL6小鼠的腦皮層血流圖，通過(guò)結(jié)扎單側(cè)頸動(dòng)脈的方法觀察小鼠側(cè)支循環(huán)形成情況。通過(guò)不同激光劑量進(jìn)行小鼠腦光化學(xué)造模，探索不同劑量激光造模的效果與特點(diǎn)。分析腦皮層缺血區(qū)域血流信號(hào)的改變與小鼠腦梗塞體積、小血管數(shù)量的關(guān)系。免疫熒光檢測(cè)小血管的變化規(guī)律及以小血管為中心的神經(jīng)細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞的變化規(guī)律。采用激光散斑成像技術(shù)驗(yàn)證尤瑞克林、米諾環(huán)素、地塞米松的對(duì)光化學(xué)腦缺血模型的作用。
　　結(jié)果：激光

3、散斑成像實(shí)現(xiàn)C57小鼠動(dòng)態(tài)的腦皮層血流檢查，C57小鼠進(jìn)行光化學(xué)腦缺血造模后可以進(jìn)行多次重復(fù)性檢查。不同劑量激光造模造成的光化學(xué)缺血灶病理改變具有不同特點(diǎn)。光化學(xué)缺血區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)化的SrCBF（Standardized Regional Cerebral Blood Flow）與缺血組織體積呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R2為0.9001；標(biāo)準(zhǔn)化的SrCBF變化趨勢(shì)與缺血區(qū)域小血管的單位面積百分比變化趨勢(shì)類似。病理結(jié)果顯示化學(xué)模型的缺血區(qū)域在1d內(nèi)

4、仍有Neun陽(yáng)性細(xì)胞；28d發(fā)現(xiàn)在缺血邊緣發(fā)現(xiàn)極少量的Neun陽(yáng)性及Brdu陽(yáng)性的細(xì)胞。通過(guò)GFAP染色，可以發(fā)現(xiàn)在光化學(xué)缺血性腦缺血模型的缺血灶的邊緣區(qū)可以發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化，5d時(shí)星形細(xì)胞活化達(dá)到頂峰，活化的星形細(xì)胞與小血管關(guān)系密切。在光化學(xué)模型的藥物篩查實(shí)驗(yàn)中，手術(shù)后3d收集比較小鼠皮層的興趣區(qū)的SrCBF，米諾環(huán)素組的局部血流量和腦缺血組織體積與對(duì)照組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：激光散斑成像系統(tǒng)能夠?qū)崟r(shí)動(dòng)態(tài)的顯示腦

5、血流的變化，這為小鼠腦皮層小血管功能和腦缺血的側(cè)支循環(huán)相關(guān)研究提供了良好的研究工具。不同劑量的光化學(xué)造?？梢灾谱鞒霾煌潭鹊娜毖Ｈ睿m合不同類型實(shí)驗(yàn)的研究需要。通過(guò)激光散斑成像的標(biāo)準(zhǔn)化的SrCBF可以作為血流量的指標(biāo)，可用于評(píng)價(jià)不同小鼠的血流恢復(fù)程度，一定程度上反映小鼠的光化學(xué)缺血灶的缺血組織體積大小，提示局部小血管的數(shù)量。光化學(xué)腦缺血模型中，小血管與神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞具有緊密關(guān)系。激光散斑成像系統(tǒng)光化學(xué)腦缺血模型檢驗(yàn)?zāi)X缺血后的