組織工程技術(shù)修復(fù)兔顳下頜關(guān)節(jié)盤穿孔的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文組織工程技術(shù)修復(fù)兔顳下頜關(guān)節(jié)盤穿孔的實(shí)驗(yàn)研究姓名：匡世軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張志光20060430中英文摘要過程中，種子細(xì)胞增殖分化，形成新的具有一定功能和形態(tài)的組織，達(dá)到修復(fù)缺損重建功能的目的。因此，組織工程技術(shù)有望成為治療關(guān)節(jié)盤穿孔或破碎的新方法，本研究試圖探討了用組織工程技術(shù)修復(fù)兔關(guān)節(jié)盤穿孔的可行性。由于組織工程技術(shù)需要大量的種子細(xì)胞和良好的細(xì)胞支架材料，本研究從種子細(xì)胞開始進(jìn)行研究，

2、觀察聚乳酸(Poly—lacticAcid，PLA)的生物相容性，體外構(gòu)建了細(xì)胞PLA支架復(fù)合物，并觀察其在體內(nèi)對(duì)關(guān)節(jié)盤穿孔的修復(fù)作用。本實(shí)驗(yàn)的研究?jī)?nèi)容如下：第1部分兔骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞和關(guān)節(jié)盤細(xì)胞的分離培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究實(shí)驗(yàn)1兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其定向誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究目的：探索分離培養(yǎng)兔骨髓問充質(zhì)于細(xì)胞(MesenchymalStemCells，MSC)I構(gòu)方法，研究在特定培養(yǎng)液作用下MSC向軟骨細(xì)胞表形轉(zhuǎn)化，探討其作為組織工程

3、化軟骨的種子細(xì)胞的可行性。材料與方法：自兔脛骨上端處抽取4—6mL骨髓后用梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，進(jìn)行原代和傳代培養(yǎng)，測(cè)定不同代次MSC生長(zhǎng)曲線，流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期，透射電鏡下觀察MSC超微結(jié)構(gòu)。對(duì)第3代MSC以TGFB進(jìn)行軟骨誘導(dǎo)分化對(duì)誘導(dǎo)后的細(xì)胞行甲苯胺藍(lán)、免疫組化染色，透射電鏡觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果：原代培養(yǎng)的MSC24h后開始貼壁，大部分呈圓形、橢圓形，72h可見集落形成，4—5d可見集落形成，1014d融合8