玉米品種DNA指紋數(shù)據庫構建關鍵技術研究.pdf

1、玉米品種DNA指紋數(shù)據庫的構建在玉米品種純度及真實性鑒定、品種權登記保護、區(qū)試及審定品種質量監(jiān)控等方面具有重要應用價值，對厘清我國玉米種質的血緣關系、雜種優(yōu)勢群劃分、種質創(chuàng)新及新品種選育具有重要指導意義。本論文研究目的是以SSR標記為技術手段，通過對DNA快速提取方法、DNA分子檢測標準試驗體系、核心引物組合、多重PCR、玉米品種DNA指紋數(shù)據庫管理系統(tǒng)、建庫標準化規(guī)范等構建玉米DNA指紋庫關鍵技術環(huán)節(jié)進行全面系統(tǒng)的研究，最終建立起玉米

2、標準DNA指紋數(shù)據庫構建的技術平臺，在此基礎上，建立國內主要玉米新品種的標準DNA指紋庫，并探索SSR技術在玉米品種鑒定中應用的可能途徑。 本論文形成如下研究結果： (1) 從DNA提取、PCR擴增、電泳檢測等環(huán)節(jié)對SSR技術進行了全面優(yōu)化，最終建立一套快速準確、經濟簡便、穩(wěn)定可靠的基于SSR分子標記的玉米DNA指紋檢測標準試驗體系。以此為基礎，制定了農業(yè)部行業(yè)標準《玉米品種鑒定DNA指紋方法》和《玉米品種一致性及真實性

3、DNA指紋檢測技術》。 (2) 對特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法等三種DNA指紋分析方法進行比較，確立以核心引物組合法作為玉米標準DNA指紋庫建庫指導原則。 (3) 從玉米數(shù)據庫公布的1900多對SSR引物中篩選出一套在玉米染色體上均勻分布的多態(tài)性高、帶型分布合理的建庫用的核心引物，并利用引物設計軟件對入選引物位點重新設計出適于相同擴增條件的新引物，最終建立起基于多重PCR和五色熒光技術的高通量的DNA指紋檢測平

4、臺。以此為主要內容，申報專利《玉米真實性檢測試劑盒及其檢測方法》。 (4) 開發(fā)了一套功能強大、界面友好的玉米品種DNA指紋數(shù)據庫管理系統(tǒng)，該系統(tǒng)的品種查詢、品種比較、親子查詢、親子鑒定等功能已完成測試。 (5) 制定了一套統(tǒng)一的建庫標準化規(guī)范和要求，為不同實驗室合作和數(shù)據整合提供基礎。 (6) 搜集整理國內主要玉米雜交種及自交系1360份，并初步建立了玉米品種標準DNA指紋數(shù)據庫。 (7) 探索研究了S