細(xì)胞周期素E、胞內(nèi)鈣在頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌中的定量檢測及臨床意義探討.pdf

1、該文分五部分:第一部分:頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌流式細(xì)胞儀檢測及激光共聚焦顯微鏡下形態(tài)學(xué)觀察;目的:檢測頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡、觀察轉(zhuǎn)移癌形態(tài)學(xué)特征.方法:將7例頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞用刀剁法制成單個(gè)細(xì)胞,PI染色,在流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡下檢測、觀察細(xì)胞凋亡情況及轉(zhuǎn)移癌形態(tài)學(xué)特征.結(jié)論:觀察、檢測的細(xì)胞符合轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞的特征,為下步實(shí)驗(yàn)提供依據(jù).第二部分:Cyclin E在頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌中定量檢測;目的:檢測Cyclin

2、 E在頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá),探討其在轉(zhuǎn)移癌中的可能作用.方法:將7例頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本分中心和外周兩部分制成單個(gè)細(xì)胞,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)在流式細(xì)胞儀、激光共焦顯微鏡下定量檢測Cyclin E表達(dá)情況,以原發(fā)喉癌作對(duì)照.結(jié)論:Cyclin E可能在頸部轉(zhuǎn)移癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用.第三部分:CyclinE和P27<'KIPI>在頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)的意義;目的:研究P27<'KIPI>和Cyclin E蛋白在頸部轉(zhuǎn)移

3、喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá),探討其在喉癌轉(zhuǎn)移中的可能作用.結(jié)論:Cyclin E在頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌中高表達(dá),P27<'KIPI>在頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)降低,二者與喉鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展機(jī)制有關(guān).第四部分:頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌胞內(nèi)鈣濃度的檢測;目的:檢測頸部轉(zhuǎn)移喉鱗狀細(xì)胞癌胞內(nèi)鈣濃度.方法:取正常喉粘膜、原發(fā)喉癌組織、轉(zhuǎn)移癌組織(中心和外周兩部分)分為4組,以Fura-2/AM為熒光指示劑,RF-5301PC熒光分光計(jì)測定胞內(nèi)鈣濃度.

4、結(jié)論:胞內(nèi)鈣在轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞中明顯降低,提示胞內(nèi)鈣與腫瘤轉(zhuǎn)移可能有一定關(guān)系. 第五部分:Br-A23187對(duì)喉癌細(xì)胞株胞內(nèi)游離鈣濃度及凋亡的影響;目的:觀察Br-A23187對(duì)喉癌細(xì)胞株(Hep-2)游離鈣濃度[Ca<'2+>]i及凋亡的影響.方法:將喉癌細(xì)胞株隨機(jī)分成對(duì)照組與3個(gè)Br-A23187處理組;以Fura-2/AM為熒光指示劑,RF-5301PC熒光光度計(jì)測定處理后5、24、48h后喉癌細(xì)胞株[Ca<'2+>]i濃度的變化;用F