版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:本研究按照國家標準委的要求建立了蒜氨酸標準物質(zhì)定值方法。國際上公認的大蒜的主要功效成分是蒜酶(EC4.1.1.4)催化蒜氨酸產(chǎn)生的大蒜辣素及其他大蒜所特有的含硫化合物。為了提高蒜酶的反應(yīng)效率,本研究采用光纖傳感過程分析技術(shù)研究蒜氨酸/蒜酶催化動力學(xué)?;谒獍彼?蒜酶催化動力學(xué)原理及二元釋藥系統(tǒng)研究思路,研制了蒜氨酸/蒜酶腸溶片,為了有效控制其質(zhì)量,本研究建立了蒜氨酸/蒜酶腸溶片有效的質(zhì)量控制方法。為闡明其作用過程和機理,本研究于體
2、外對蒜氨酸在大鼠血液中的分布進行研究。
方法:1.應(yīng)用高效液相色譜面積歸一化法確定蒜氨酸標準物質(zhì)的純度。對樣品進行均勻性檢驗及長期穩(wěn)定性檢驗,以此為基礎(chǔ)采取9個實驗室協(xié)作定值的方法對樣品進行檢測定值。2.采用光纖傳感過程分析技術(shù)研究蒜氨酸/蒜酶催化動力學(xué),根據(jù)朗伯—比爾定律,建立了兩種數(shù)學(xué)模型,一種是測定反應(yīng)中各物質(zhì)的吸光系數(shù),另一種是將產(chǎn)物看作整體。根據(jù)紫外光譜,確定檢測波長及探頭規(guī)格,進一步測定各參數(shù)值。將參數(shù)錄入工作站,
3、系列濃度蒜氨酸與固定濃度蒜酶以體積比1:1進行混合反應(yīng),動態(tài)監(jiān)測蒜氨酸濃度變化。導(dǎo)出數(shù)據(jù),經(jīng)Origin7.5軟件及雙倒數(shù)法處理最終求得催化動力學(xué)參數(shù)Km及νmax。所測結(jié)果同HPLC方法求得的值進行比較。3.采用 TLC法對蒜氨酸/蒜酶腸溶片中的蒜氨酸、潛在大蒜辣素進行定性鑒別;參照中國藥典2010版,采用籃法檢查制劑的體外釋放度;采用HPLC法對制劑中的蒜氨酸、潛在大蒜辣素進行含量測定。4.采用鄰苯二甲醛為柱前衍生化試劑,結(jié)合反相高
4、效液相色譜建立血漿樣品中蒜氨酸含量測定方法。分別用超濾法及微透析法測定蒜氨酸與大鼠體外血漿蛋白結(jié)合率,評價體內(nèi)微透析取樣的可行性。蒜氨酸加入大鼠血液中,經(jīng)孵育后,分別測定全血、血漿及血細胞中蒜氨酸的含量,考察蒜氨酸在血液中的分布情況。
結(jié)果:1.均勻性檢驗數(shù)據(jù)經(jīng)F檢驗,樣品均勻性良好。長期穩(wěn)定性檢驗數(shù)據(jù)經(jīng)t檢驗,表明在4℃條件下蒜氨酸至少穩(wěn)定43個月。最終定值結(jié)果由標準值和不確定度表示為(99.5±0.95)%。2.檢測波長為
5、230nm,探頭規(guī)格為5mm。建立的數(shù)學(xué)模型可以有效地獲取蒜氨酸/蒜酶催化反應(yīng)過程曲線。3種方法Km值無顯著性差異,HPLC方法測得的νmax同數(shù)學(xué)模型測定結(jié)果有顯著性差異。3.薄層色譜中蒜氨酸、潛在大蒜辣素特征斑點清晰;制劑在pH1.0鹽酸溶液中2h未檢出大蒜辣素,在pH6.8的磷酸鹽緩沖液中開始釋放,2h的累計釋放度達70%以上;二批樣品含蒜氨酸分別為51.58mg/片、55.24mg/片,含大蒜辣素分別為13.73mg/片、21.
6、08mg/片。輔料在整個研究中不干擾測定。4.經(jīng)系統(tǒng)的方法學(xué)考察,所建立的含量測定方法具有較好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。超濾法與微透析方法測定的蛋白結(jié)合率無顯著性差異,且與濃度呈依賴關(guān)系。血漿及血細胞中均有蒜氨酸分布,且血漿中的濃度較高;全血中濃度較加入量有所降低。
結(jié)論:1.研制的蒜氨酸標準物質(zhì)通過了國家標準委的審評并獲得蒜氨酸國家標準樣品證書,填補了國內(nèi)空白。2.蒜氨酸/蒜酶系統(tǒng)催化反應(yīng)很快,采用光纖傳感過程分析技術(shù)實時監(jiān)測催化反
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 鮮蒜、蒜氨酸、蒜酶定量分析方法與蒜氨酸質(zhì)量標準研究.pdf
- 蒜氨酸酶和蒜氨酸超聲輔助提取技術(shù)研究.pdf
- 大蒜有效部位蒜氨酸原料藥的穩(wěn)定性及相關(guān)研究.pdf
- 洋蔥中蒜氨酸酶的分離純化及其酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf
- 大蒜植株中蒜氨酸酶的分離及酶學(xué)特性研究.pdf
- 腸康寧二元釋藥膠囊的藥學(xué)研究.pdf
- 蒜氨酸酶的分離純化與中試生產(chǎn)檢測.pdf
- 結(jié)晶蒜氨酸制備及其工藝設(shè)計
- 蒜氨酸的提取及純化方法研究.pdf
- 蒜氨酸的提取、分離及純化.pdf
- 蒜氨酸的提取及純化工藝研究.pdf
- 結(jié)晶蒜氨酸生產(chǎn)車間-劉玨.dwg
- 結(jié)晶蒜氨酸制備及其工藝設(shè)計.doc
- 蒜氨酸檢測方法及提取分離工藝研究.pdf
- 蒜氨酸和大蒜多糖提取分離實驗研究.pdf
- 蒜氨酸對照品的制備及其質(zhì)量研究.pdf
- 結(jié)晶蒜氨酸生產(chǎn)車間-劉玨.dwg
- 結(jié)晶蒜氨酸生產(chǎn)車間-劉玨.dwg
- γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、蒜氨酸酶與大蒜綠變的關(guān)系.pdf
- 蒜氨酸原料藥的中試生產(chǎn)工藝及分析方法研究.pdf
評論
0/150
提交評論