蓖麻單雌性狀的ISSR分析.pdf

1、蓖麻是一種傳統(tǒng)的具有特殊用途的油源植物，是世界十大油料作物之一。傳統(tǒng)的蓖麻品種選育方法只能從表型上選擇，而不能從分子水平上選擇，需要人工去雄費(fèi)工費(fèi)時。而雜種優(yōu)勢利用是提高蓖麻產(chǎn)量和品質(zhì)的有效途徑，蓖麻雜優(yōu)利用主要源于單雌蓖麻的利用研究。單雌蓖麻的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用，為蓖麻雜種優(yōu)勢利用開辟了新的途徑。目前對蓖麻單雌性狀遺傳規(guī)律及相關(guān)基礎(chǔ)研究相對較少，本實(shí)驗(yàn)以一對蓖麻雌性系和自交系以及雜交后的F2代單株為材料，對蓖麻單雌性狀進(jìn)行了研究，旨在通過對蓖

2、麻單雌性的研究，探尋與該性狀相關(guān)的分子標(biāo)記，為準(zhǔn)確、快速地選育全雌蓖麻奠定基礎(chǔ)，有利于縮短蓖麻育種年限，加速育種進(jìn)程。本研究結(jié)果如下:
　　1.蓖麻基因組DNA提取方法的比較采用改良的CTAB法和SDS法提取蓖麻基因組DNA，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，結(jié)果表明改良的CTAB法比SDS法提取的基因組DNA條帶整齊，清晰，純度高。由于蓖麻葉片中含有大量的酚類物質(zhì)和多糖，因此在提取緩沖液中加入一定量的β-巰基乙醇和PVP，防止酚類氧化發(fā)生褐

3、變。
　　2.建立了穩(wěn)定的蓖麻ISSR反應(yīng)體系采用正交試驗(yàn)設(shè)計和單因子實(shí)驗(yàn)兩種方法對影響ISSR-PCR反應(yīng)的因素如Mg2+濃度、dNTP濃度、引物濃度、TaqDNA聚合酶濃度、模板DNA用量以及退火溫度等進(jìn)行了優(yōu)化，得到的結(jié)果一致。建立了適合單雌蓖麻ISSR擴(kuò)增的反應(yīng)體系，即在20μL反應(yīng)體系中，10×PCR buffer2.5μL，模板DNA10ng，2.0mmol/L MgCl2，引物濃度1.0μmol/L，dNTP0.4m