基于農(nóng)藝性狀和ISSR分子標(biāo)記的四川部分棗資源的親緣關(guān)系分析.pdf

1、棗（Ziziphus Jujuba Mill.）為鼠李科棗屬的落葉灌木或小喬木，我國(guó)集中了全世界大約98％的棗屬植物資源，南北分布極為廣泛。棗樹具有早果速豐、抗逆性強(qiáng)、投資少見效快等特點(diǎn)，是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)林木。棗樹在川中丘陵區(qū)已有大面積規(guī)?；N植，本課題組在對(duì)四川本土棗樹資源進(jìn)行深入調(diào)查時(shí)，發(fā)現(xiàn)四川搠有一批優(yōu)良的地方品種（如米棗、調(diào)元棗、油棗等）和引種品種（如蜂蜜罐棗、華仁冬棗等），而米棗資源在四川綿陽三臺(tái)縣嶄山村、成都市蒲江長(zhǎng)秋鄉(xiāng)、眉

2、山市岐山村等地均有集中分布，它們各自在葉片和果實(shí)形態(tài)上具有一定差異。此外，在對(duì)綿陽三臺(tái)的米棗資源進(jìn)行調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)了與原種質(zhì)有差異的大果型和蘋果型株系。
　　本研究利用ISSR分子標(biāo)記和農(nóng)藝性狀相結(jié)合的方法，對(duì)來自四川的22份棗樹材料進(jìn)行了親緣關(guān)系分析，其中包括有3個(gè)地區(qū)的米棗資源、三臺(tái)嶄山米棗中的大果型和蘋果型株系、其他四川本土棗樹資源及引種品種，旨在弄清四川各地棗樹種質(zhì)間的遺傳聯(lián)系，為棗屬植物的種類鑒定、優(yōu)良資源篩選及新品種選育提

3、供一定的參考。本研究結(jié)果如下:
　　1.提取得到了高質(zhì)量的DNA用于ISSR擴(kuò)增，并建立了適用于棗樹ISSR-PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系，體系包括0.8μmol/L引物濃度，80ng模板，10.0μL2×Taq PCR MasterMix，總體積為20μL。
　　2.從哥倫比亞大學(xué)公布的100條引物中篩選出了11條譜帶清晰且多態(tài)性豐富的引物用于擴(kuò)增，共擴(kuò)增出80條譜帶，平均每條引物擴(kuò)增出7.27條，其中有55條帶具有遺傳多態(tài)性，約

4、占總數(shù)的68.75％。
　　3.對(duì)22份棗樹材料進(jìn)行了遺傳相似系數(shù)和UPGMA聚類分析，建立了22份棗樹材料的樹狀聚類圖譜，各材料的遺傳相似系數(shù)在0.59～1.00之間，在遺傳相似系數(shù)為0.73處可將供試材料分為4類:1-5號(hào)與15-17號(hào)聚為第一大類，6-14號(hào)聚為第二大類，18號(hào)與20-22號(hào)聚為第三大類，19號(hào)被單獨(dú)劃為一類。
　　4.依據(jù)22份材料的農(nóng)藝性狀，對(duì)農(nóng)藝性狀中的25個(gè)數(shù)量性狀進(jìn)行了變異度和主成份分析，并依

5、據(jù)《棗種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)其質(zhì)量性狀進(jìn)行了賦值處理。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，變異度最大的性狀是始果年齡和可滴定酸，分別為2.588、2.346;最小的性狀是可食率，為0.022。從25個(gè)數(shù)量性狀中，共提取出22個(gè)性狀，它們被歸納為9個(gè)主成份，綜合貢獻(xiàn)率達(dá)到71.869％，其中平均單核重、果核縱徑、果實(shí)縱徑、棗頭長(zhǎng)度、葉片橫徑、棗頭粗度、果核橫徑等性狀的貢獻(xiàn)率較大。
　　5.以22個(gè)數(shù)量性狀和17個(gè)質(zhì)量性狀為基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，計(jì)算了22份材料間

6、的歐氏距離，3號(hào)（岐山米棗嫁接樹）和5號(hào)（長(zhǎng)秋米棗根孽樹）的歐式距離最小，為1.039。歐氏距離最大的是6號(hào)（嶄山米棗母樹）和15號(hào)（沾化冬棗），達(dá)4.589，平均歐氏距離為2.746。根據(jù)遺傳距離，分別用Ward's法和組間聯(lián)結(jié)法進(jìn)行了聚類分析，兩種聚類方法均把1-5號(hào)與16、17號(hào)聚為一類，6-14號(hào)聚為一類，不同在于Ward's法是將18、19號(hào)先聚為一類后再聚合了21號(hào)，剩余15號(hào)、20號(hào)、22號(hào)聚為一類，而組間聯(lián)結(jié)法則只將18

7、號(hào)和19號(hào)聚為一類，其余各自為類。
　　6.綜合形態(tài)聚類分析和分子聚類結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩種方法獲得的聚類結(jié)果存在高度的一致性，僅在細(xì)微處存在一定的差異，這主要表現(xiàn)在15號(hào)（沾化冬棗）被歸為了來源于四川的大核棗類，說明其與四川的大核棗類資源的親緣關(guān)系較近，18號(hào)（胎里紅）與19號(hào)（蜂蜜罐）分別與20-22號(hào)（金絲小棗、和田玉棗、駿棗）混聚，說明不同用途的品種在遺傳上表現(xiàn)出了較大的差異;此外，岐山米棗和長(zhǎng)秋米棗應(yīng)為同一種質(zhì)，嶄山米棗與其余2