擬用于中藥及藥用植物分析的熒光標記試劑研究.pdf

1、中藥化學成分非常復雜，由多個中藥組成的復方成分就更復雜了，這給質(zhì)量控制帶來了極大的挑戰(zhàn)。面對中藥多成分復雜體系，特別是湯劑中極性大的成分，高靈敏度、高選擇性的分析方法就顯得非常重要，而這恰恰是中藥分析和質(zhì)量控制中的瓶頸問題。針對多成分體系，液相色譜是很好的選擇，但湯劑中成分的極性很大，在常用反相柱上保留時間很短，很難達到有效分離。大多數(shù)成分沒有紫外吸收官能團，難以進行高靈敏度檢測。這些問題和挑戰(zhàn)的存在呼喚著新的研究策略，以適應對高靈敏度

2、、高選擇性分析方法的需求。
　　 在研究單萜吲哚生物堿的仿生合成過程中發(fā)現(xiàn)裂環(huán)馬錢素在不同pH值時會發(fā)生不同的重排轉(zhuǎn)化，因此推測單萜吲哚生物堿結(jié)構(gòu)多樣性的一個重要原因可能源于植物體中不同pH值的影響。如果能夠證實pH值能夠影響次生代謝產(chǎn)物的合成，則對揭示次生代謝產(chǎn)物的生物合成途徑有很大的幫助，也有可能通過化學或生物的方法來調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的pH值定向提高特定目標產(chǎn)物的產(chǎn)率，因此不僅具有重要的理論意義，也具有潛在的應用價值。
　

3、　 針對上述問題，本文開展了以下工作：以間苯二酚，鄰苯二甲酸酐，偏三苯酐為原料，采用一步法、分步法合成了三種熒光素母體，并對合成工藝進行了優(yōu)化，對目標化合物進行了結(jié)構(gòu)表征。為了增加熒光素對pH值的敏感性，以3種熒光素母體為原料，設計合成了兩類熒光素衍生物：熒光素氨基酸衍生物，熒光素環(huán)狀仲胺衍生物，共計16個衍生物，并對化合物進行了結(jié)構(gòu)表征，所有化合物均為首次合成。采用熒光分光光度計對合成衍生物的熒光性質(zhì)進行了測定，得到了化合物的熒光激

4、發(fā)，發(fā)射圖譜，確定了化合物的最大激發(fā)，發(fā)射波長；測定兩類化合物在不同pH值條件下的熒光發(fā)射光譜，確定了它們對pH值的響應規(guī)律。
　　 針對醛酮類化合物特有的官能團，設計合成了兩種氨基熒光素和一種氨基香豆素；開發(fā)了一種溫和的二氫吡啶還原劑，利用還原胺化反應對醛酮類化合物進行了標記實驗，最終以氨基香豆素成功標記了10個醛類化合物，對標記結(jié)果進行了結(jié)構(gòu)表征。
　　 針對氨基酸類化合物特有的官能團，合成了兩種羥基熒光試劑，在曼尼