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文檔簡介
1、研究目的:
目前臨床上對可降解膽道支架有迫切需求。本課題旨在研究可降解鎂鋅合金材料與肝外膽管上皮細胞(MEBDECs)的生物相容性及其在膽總管中的降解行為。
材料和方法:
本課題包括體內外的動物實驗、細胞實驗和降解實驗。具體如下:鎂鋅合金支架植入家兔膽總管后,檢測術前和術后重要血生化指標的變化;膽總管、肝、腎組織切片作HE染色和免疫組化檢測;支架植入膽總管后作CT掃描檢查;膽總管中取出的支架作失重和掃描電鏡
2、檢查;在體外實驗中,原代的肝外膽管上皮細胞與不同濃度的鎂鋅合金浸提液培養(yǎng),作MTT評估其毒性、流式細胞儀檢測細胞周期和凋亡;電化學試驗、浸泡、析氫試驗等方法用來評估鎂鋅合金在膽汁中的降解速率;樣本表面作掃描電鏡和元素圖譜分析。
研究結果:
生物相容性:
1.體內實驗:支架植入家兔膽總管后,其術前術后的重要血生化指標水平無明顯變化。膽總管等組織沒有明顯的壞死和炎癥改變。鎂鋅合金支架植入后會引起膽總管組織中ca
3、spase3基因表達降低。
2.體外細胞學實驗:MTT檢測表明:20%-40%濃度的鎂鋅合金浸提液對MEBECs的生長無明顯影響。流式細胞儀檢查發(fā)現(xiàn):140%濃度的浸提液會引起細胞凋亡,100%濃度的浸提液會導致MEBECs細胞周期S期阻滯和導致細胞壞死。RT-PCR結果表明,40%濃度的浸提液會引起B(yǎng)ax、Bax/Bcl-2、NF-κ B、caspase-3表達增高。
降解行為:
1.體外實驗。鎂鋅合金圓
4、片在膽汁中浸泡1、4、7和10天后,其重量分別減少了2.5、14.1、15.4和14.2 mg。相比于在Hanks液中,在膽汁中浸泡10天后的樣本表面有更多的降解產物。鎂鋅合金在膽汁中的降解速率快于其在Hanks液中、其在膽汁中的交流阻抗比在Hanks液中低。
2.體內實驗。鎂鋅合金支架植入后一周幾乎無明顯降解,三周后膽總管中僅剩有9%的支架。鎂鋅合金在膽總管中的降解率約為0.107 mm2year-1。CT和掃描電鏡也證明了
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