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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1、對(duì)不同配比的絲素蛋白/PLGA復(fù)合材料試件進(jìn)行體內(nèi)、外降解實(shí)驗(yàn),制備研究符合裝置設(shè)計(jì)降解時(shí)間要求的復(fù)合材料。
2、對(duì)不同配比的絲素蛋白/PLGA復(fù)合材料試件進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn),評(píng)價(jià)其組織相容性,最終找到一種安全性、可靠性最佳的材料配比。
方法:
1.復(fù)合材料制備。將絲素蛋白與PLGA粉末按不同配比(1:5,1:10,1:20)溶解于氯仿中攪拌成糊狀,再將其自然平鋪于玻璃板上。干燥后裁剪成
2、1.5cm×1.5cm大小復(fù)合材料片,干燥冷藏備用。
2.材料體外靜態(tài)降解實(shí)驗(yàn)。在人工模擬腸液中放入絲素蛋白PLGA復(fù)合材料試件,然后置于恒溫箱內(nèi),并維持降解溫度在37℃左右,按時(shí)更換人工腸液(每周一次)。在第7、14、21、28、42、56天,六個(gè)時(shí)間點(diǎn),分別從恒溫箱中拿出膜片,然后干燥至恒重,計(jì)算其失重率,以此評(píng)價(jià)其降解速率。
3.絲素蛋白/PLGA復(fù)合材料的生物相容性評(píng)價(jià)。我們以絲素蛋白/PLGA復(fù)合材料浸提液
3、的溶血實(shí)驗(yàn)、微核實(shí)驗(yàn);復(fù)合材料膜片的切口組織羥脯氨酸測(cè)定、HE染色、Masson染色等來(lái)評(píng)價(jià)絲素蛋白/PLGA復(fù)合材料生物相容性。
結(jié)果:
1、絲素蛋白PLGA復(fù)合材料隨著時(shí)間的推移,逐漸出現(xiàn)降解現(xiàn)象,自第2周開(kāi)始,試件表面可見(jiàn)明顯的蟲(chóng)蝕樣細(xì)小空洞,在此基礎(chǔ)上降解加快,試件變脆崩解,在2-4周降解速率最快,在第4周末降解率可達(dá)到66.8%-82.6%,隨后降解速率明顯下降;
2、絲素蛋白PLGA復(fù)合材料的溶
4、血率、微核率均小于5%,依次評(píng)價(jià)其生物相容性符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn);
3、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)初步表明:
?、貶E染色中,在術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)各配比絲素蛋白PLGA復(fù)合材料組切口周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較陽(yáng)性橡膠對(duì)照組少;
?、诓煌浔鹊慕z素蛋白PLGA組的羥脯氨酸均隨時(shí)間推移逐漸升高。術(shù)后3、7、14天各時(shí)間點(diǎn),不同配比復(fù)合材料組在同一時(shí)間點(diǎn)與橡膠組均具有顯著差異(p<0.05),不同配比復(fù)合材料組之間在同一時(shí)間點(diǎn)對(duì)比有顯著差異(p<0.
5、05),不同配比復(fù)合材料組之間在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)比也有顯著差異(p<0.05)。
③Masson染色中吻合口處膠原纖維為藍(lán)綠色,肌纖維及纖維素為紅色。7天時(shí)我們可見(jiàn)到炎癥細(xì)胞堆積,纖維細(xì)胞增生,少量膠原沉積,膠原纖細(xì)、稀疏。14天時(shí)吻合口處見(jiàn)大量膠原沉積,膠原粗大、密集。
結(jié)論:1.通過(guò)調(diào)節(jié)絲素蛋白及PLGA材料之間的配比,可以使復(fù)合材料具有不同降解速度而滿足不同使用要求;絲素蛋白與PLGA的質(zhì)量配比以1:10左右較適合
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