EGFR、CTGF在嬰兒膽道梗阻肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：觀察表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)在嬰兒膽道梗阻肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的表達(dá)。探討在嬰兒膽道梗阻時(shí)，EGFR及CTGF細(xì)胞因子與肝內(nèi)膽小管增生的關(guān)系，從而說(shuō)明EGFR及CTGF細(xì)胞因子在嬰兒膽道梗阻時(shí)，在肝纖維化過(guò)程的作用。從而闡明膽道梗阻患兒的肝纖維化進(jìn)展迅速的部分機(jī)制。 方法：標(biāo)本選自河北醫(yī)大二院住院的膽道梗阻患兒手術(shù)活檢肝組織20例(觀察組)，均以行99mTC-EHIDA(美國(guó)產(chǎn)INFINIA-

2、II-hawkeye檢查設(shè)備)肝膽顯像追蹤至24 h內(nèi)膽囊和腸道未出現(xiàn)放射性顯影為標(biāo)準(zhǔn)，并選取無(wú)肝膽疾患的年齡為180天內(nèi)患兒尸檢肝組織蠟塊5例做為對(duì)照組。手術(shù)探查時(shí)取肝尾葉組織約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小，10％福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片，經(jīng)脫脂至水洗，行Masson三色染色。光鏡觀察肝小葉匯管區(qū)結(jié)構(gòu)。應(yīng)用PV免疫組化方法染色對(duì)每組抗原進(jìn)行標(biāo)記。分別用兔抗人表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)單克隆抗體(編號(hào)，ZA

3、-0505，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)及兔抗人多克隆抗體(編號(hào)BA0752，武漢博士德生物工程有限公司)。采用用PV免疫組化方法二步檢測(cè)(PV6001，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)及DAB顯色。根據(jù)Masson三色染色觀察膽小管增生的程度及肝纖維化的程度并結(jié)合EGFR及CTGF免疫組化染色檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果：膽道梗阻各組EGFR及CTGF免疫組化染色陽(yáng)性分布程度均明顯高于對(duì)照組。膽道閉鎖組和濃縮膽栓綜合征組間EG

4、FR及CTGF的表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)明顯差異(三組EGFR表達(dá)陽(yáng)性總體分布不同：Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)示H=19.224，P<0.01；各組間兩兩比較均P<0.01：三組CTGF表達(dá)陽(yáng)性總體分布不同：Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)示H=17.517，P<0.01；各組間兩兩比較：膽栓組、對(duì)照組分別與閉鎖組比較均P<0.01，膽栓組與對(duì)照組比較P=0.127，P>0.05)。膽道梗阻組肝組織門(mén)管區(qū)膽小管增生及纖維化明顯，對(duì)照

5、組肝組織無(wú)明顯膽小管增生及纖維化。膽道梗阻組內(nèi)膽道閉鎖組和濃縮膽栓綜合征組間膽小管增生及肝纖維化的程度不同(采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)示兩組間肝纖維化的程度u=4.170，P<0.01；膽小管增生程度u=3.642，P<0.01)。在膽道梗阻組內(nèi)，EGFR及CTGF與膽小管增生的程度具有相關(guān)關(guān)系且呈正相關(guān)(采用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)示EGFR與膽小管增生的程度rs=0.542，P=0.005，P<0.01；CTGF與膽小

6、管增生的程度rs=0.637，P=0.001，P<0.01)；膽小管增生的程度與肝纖維化的程度具有相關(guān)關(guān)系且呈正相關(guān)(Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)示rs=9.913，P=10-6，P<0.01)；EGFR與CTGF的表達(dá)具有相關(guān)關(guān)系且呈正相關(guān)(Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)示rs=0.587，P=0.002，P<0.01)。 結(jié)論：EGFR是嬰兒膽道梗阻肝纖維化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中重要的細(xì)胞膜受體，CTGF是嬰兒膽道梗阻肝纖維化發(fā)生發(fā)展