不同腎上腺素能受體阻滯劑對(duì)鈣調(diào)磷酸酶在心肌凋亡中作用的影響.pdf

1、目的：研究鈣調(diào)磷酸酶(Calcineurin，CaN)在缺血再灌注(Ischemia/reperfusion，I/R)及異丙腎上腺素(Isoproterenol，Iso)致心肌凋亡時(shí)的作用。研究不同選擇性的β-腎上腺素能受體阻滯劑對(duì)缺血/再灌注(I/R)及異丙腎上腺素(Iso)致心肌凋亡時(shí)心肌細(xì)胞凋亡率的影響及其對(duì)鈣調(diào)磷酸酶(CaN)的調(diào)節(jié)作用。 方法:采用Langendorff大鼠離體心臟灌流技術(shù)，制備不同時(shí)間缺血/再灌注(I

2、/R)和/或不同劑量異丙基腎上腺素(Iso)所致心肌損傷模型，在此基礎(chǔ)上給予鈣調(diào)磷酸酶抑制劑環(huán)孢素A(CyclosporinA，CsA)，觀察心肌細(xì)胞凋亡率的變化及鈣調(diào)磷酸酶(CaN)的表達(dá)，由原位末端標(biāo)記染色法(TdT-mediateddUTPnickendlabeling，TUNEL)確定心肌細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化，RT-PCR法檢測(cè)CaNmRNA水平。采用Langendorf

3、f大鼠離體心臟灌流技術(shù)制備I/R+Iso所致離體心臟損傷模型，在損傷模型基礎(chǔ)上給予不同選擇性的β-腎上腺素能受體阻滯劑(阿替洛爾、卡維地洛)進(jìn)行干預(yù)，觀察不同藥物對(duì)心肌細(xì)胞凋亡率及CaNmRNA表達(dá)的影響，用TUNEL法確定心肌細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率，RT-PCR法檢測(cè)CaNmRNA水平。 結(jié)果:單純Iso在一定劑量時(shí)可致心肌細(xì)胞凋亡，并可增加I/R所誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡率，CaNmRNA水平隨之增加，CaN抑制劑

4、環(huán)孢素A(CyclosporinA，CsA)可降低I/R和Iso共同作用所誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡率。采用Langendorff大鼠離體心臟灌流技術(shù)制備的I/R+Iso所致心肌損傷模型，經(jīng)卡維地洛干預(yù)后，心肌細(xì)胞凋亡率和CaNmRNA水平與干預(yù)前比較均降低(P＜0.05)，二者變化趨勢(shì)呈正相關(guān)；經(jīng)阿替洛爾干預(yù)后，心肌細(xì)胞凋亡率和CaNmRNA水平與干預(yù)前比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 結(jié)論:一定劑量的異丙腎上腺素可促進(jìn)I/R誘導(dǎo)的