α-受體阻滯劑和β-受體阻滯劑對內(nèi)皮素-1介導(dǎo)肝星狀細(xì)胞收縮的影響.pdf

1、目的:
　　探討α-AR阻滯劑和β-AR阻滯劑對ET-1介導(dǎo)的HSCs收縮的影響,為β-AR阻滯劑聯(lián)用α-AR阻滯劑降低肝硬化門脈高壓提供新的理論依據(jù)。
　　方法:
　　1體外培養(yǎng)HSCs，Western blot檢測HSCs AR蛋白的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測腎上腺素受體亞型在HSCs的分布與定位。
　　2應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡（laser confocal scanning microscope,LSCM），采

2、用第三代鈣熒光探針Fluo-3/AM觀察α-AR阻滯劑（酚妥拉明）、非選擇性β-AR阻滯劑（普萘洛爾）、β1-AR阻滯劑（美托洛爾）及β2-AR阻滯劑（ICI-118551）對正常HSCs以及ET（1.1×10-9 mol·L-1）介導(dǎo)下的HSCs[Ca2+]i熒光強(qiáng)度、細(xì)胞面積及最大長徑變化的影響。
　　3計(jì)量資料數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±S)表示，用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P﹤0.05作為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。
　

3、　結(jié)果:
　　1 Western blot證實(shí)HSCs表達(dá)α-AR、β1-AR、β2-AR分別在大約57 kD、50 kD、47 kD位置出現(xiàn)α-AR、β1-AR、β2-AR特異性條帶。
　　2免疫細(xì)胞化學(xué)法證實(shí)HSCs可以表達(dá)α-AR、β1-AR、β2-AR,且α-AR、β1-AR、β2-AR在HSCs中的分布基本一致，主要分布于細(xì)胞漿，細(xì)胞膜也有少量表達(dá)。
　　3除β1-AR阻滯劑美托洛爾外，其余各AR阻滯劑能夠?qū)?/p>

4、致HSCs[Ca2+]i顯著下降(P＜0.05)；但各AR阻滯劑對HSCs收縮無顯著影響。
　　4 ET-1能夠引發(fā)的HSCs[Ca2+]i瞬間而短暫的升高，且出現(xiàn)HSCs面積及最大直徑顯著減小，EC50值約在1.1×10-9mol?L-1。
　　5除β1-AR阻滯劑美托洛爾外，其余各AR阻滯劑能夠顯著抑制ET-1引起的HSC內(nèi)Ca2+濃度升高及收縮作用(P＜0.05)，其中β2-AR阻滯劑(ICI11-8551)組和α+β

5、-AR阻滯劑(酚妥拉明+普萘洛爾)阻滯劑組作用最顯著。
　　結(jié)論:
　　1 HSCs可以表達(dá)α-AR、β1-AR和β2-AR腎上腺素受體蛋白主要分布于HSCs的細(xì)胞漿，細(xì)胞膜也有少量表達(dá)。
　　2普萘洛爾、酚妥拉明、ICI-118551不僅能夠引起HSC[Ca2+]i下降，還能夠抑制ET-1介導(dǎo)的HSCs收縮，以ICI-118551及酚妥拉明+普萘洛爾聯(lián)用時(shí)用更強(qiáng)。
　　3β1-AR阻滯劑美托洛爾既不能夠引起HS