雞體內(nèi)鎘含量調(diào)查及多糖對(duì)鎘中毒雛雞中樞免疫器官損傷的影響.pdf

1、鎘作為一種廣泛存在的重金屬可蓄積在動(dòng)物的器官組織中，長(zhǎng)期低水平的鎘接觸能夠引起機(jī)體大量自由基堆積、細(xì)胞因子含量變化等反應(yīng)。植物多糖普遍存在免疫調(diào)節(jié)作用，并能夠消除活性氧自由基，從而減輕機(jī)體的損傷。本試驗(yàn)對(duì)哈爾濱市區(qū)內(nèi)雞體內(nèi)鎘含量進(jìn)行調(diào)查，并從模式識(shí)別受體和氧化應(yīng)激的角度對(duì)植物多糖（姬松茸多糖和靈芝多糖）減輕鎘中毒雛雞免疫器官和細(xì)胞損傷作用及機(jī)制進(jìn)行了研究。
　　采用質(zhì)譜法對(duì)哈爾濱市區(qū)超市內(nèi)抽取的雞肝臟、肌肉共計(jì)60份樣品中鎘含量進(jìn)

2、行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，檢測(cè)樣品中均有鎘檢出，但含量均低于食品中污染物限量中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB2762-2012)中鎘限量的標(biāo)準(zhǔn)。
　　在體內(nèi)試驗(yàn)部分，將7日齡海蘭白雞分為對(duì)照組、鎘組、姬松茸多糖+鎘組和靈芝多糖+鎘組，連續(xù)飼喂鎘、姬松茸多糖、靈芝多糖20天、40天、60天后取中樞免疫器官（胸腺、法氏囊），采用質(zhì)譜法、Western Blot法、ELISA法及生物化學(xué)方法對(duì)雛雞胸腺、法氏囊鎘含量、TLR4表達(dá)、細(xì)胞因子含量及氧化

3、-抗氧化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):鎘組雛雞胸腺、法氏囊中鎘含量極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，兩種多糖治療組鎘含量極顯著低于鎘組(P＜0.01);鎘組、多糖治療組雛雞胸腺、法氏囊中TLR4蛋白表達(dá)在感染鎘第20天時(shí)較對(duì)照組降低，而在第40天和60天時(shí)，鎘組中TLR4表達(dá)高于對(duì)照組，多糖治療組的TLR4表達(dá)低于鎘組;鎘組雛雞胸腺和法氏囊中細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-β含量較對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)，多糖治療組I

4、L-1β、IL-6、TNF-α、IFN-β的含量介于對(duì)照組和鎘組之間;鎘組雛雞胸腺、法氏囊的SOD、GSH-Px活性極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，MDA含量極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，多糖治療組SOD、GSH-Px活性極顯著高于鎘組(P＜0.01)，MDA含量極顯著低于鎘組(P＜0.01)。結(jié)果表明:姬松茸多糖和靈芝多糖可通過(guò)降低鎘中毒雛雞胸腺和法氏囊中鎘含量、TLR4表達(dá)、細(xì)胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-

5、β)含量、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量，增加抗氧化酶SOD、GSH-Px活性來(lái)減輕鎘對(duì)雛雞中樞免疫器官的損傷。
　　在體外試驗(yàn)部分，將健康雛雞外周血淋巴細(xì)胞分成對(duì)照組、鎘組、靈芝多糖組、脂多糖組、TLR4抑制劑組、靈芝多糖+鎘組、脂多糖+鎘組、TLR4抑制劑+鎘組，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞TLR4及其信號(hào)通路相關(guān)信號(hào)分子NF-κB、IRF3及細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)

6、:脂多糖+鎘組的雛雞外周血淋巴細(xì)胞中TLR4、NF-κB、IRF3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量均為最高，但脂多糖和鎘單獨(dú)刺激組并未對(duì)其表達(dá)有明顯影響，TLR4抑制劑(TAK-242)組中TLR4、NF-κB、IRF3 mRNA相對(duì)表達(dá)量最低;與鎘組相比，靈芝多糖治療組TLR4 mRNA的表達(dá)下降，但NF-κB、IRF3 mRNA表達(dá)增加，TLR4抑制劑(TAK-242)+鎘組的趨勢(shì)與靈芝多糖治療組相似。與對(duì)照組相比，鎘組IL-1β、IL-6、

7、TNF-α mRNA的表達(dá)水平有顯著升高(P＜0.01或P＜0.05)，但多糖治療后對(duì)IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA水平表達(dá)的影響結(jié)果不一。結(jié)果表明:鎘能通過(guò)激活TLR4信號(hào)通路引起機(jī)體損傷，靈芝多糖通過(guò)對(duì)TLR4信號(hào)通路的抑制作用減輕鎘引起的損傷。
　　本研究表明，姬松茸多糖和靈芝多糖對(duì)鎘中毒導(dǎo)致的雛雞中樞免疫器官和外周血淋巴細(xì)胞損傷的保護(hù)作用與TLR4信號(hào)通路和氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)。本試驗(yàn)為進(jìn)一步研究鎘損傷及減輕鎘