膀胱移行細(xì)胞癌尿液和組織中Survivin mRNA及蛋白的表達(dá)及意義.pdf

1、背景和目的: 膀胱移行細(xì)胞癌是泌尿外科常見(jiàn)的腫瘤，隨著人均壽命延長(zhǎng)，工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展所致環(huán)境污染，膀胱癌的發(fā)病率有增加趨勢(shì)。在世界范圍內(nèi)其發(fā)病居泌尿外科腫瘤的第二位，而在我國(guó)其發(fā)病率及死亡率占泌尿外科腫瘤首位。其主要病理特點(diǎn)為多發(fā)性及易復(fù)發(fā)性，因此給家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和精神壓力。為了探討其發(fā)病機(jī)制以及治療方法，人們對(duì)由基因引起細(xì)胞程序化死亡調(diào)節(jié)的理論即細(xì)胞凋亡理論做了重點(diǎn)研究。凋亡抑制基因?qū)?xì)胞程序化死亡的調(diào)節(jié)是促進(jìn)細(xì)

2、胞增殖而抑制其死亡，從而成為腫瘤形成的一個(gè)重要的分子生物學(xué)機(jī)制。Survivin基因是迄今發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的凋亡抑制基因之一。它能抑制細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)細(xì)胞的增殖，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的有絲分裂，并可參與血管生成。為了解Survivin基因在膀胱癌中的表達(dá)及其與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后等多方面的關(guān)系，本文采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linked-inmunosorbentassay，ELISA)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)和免疫組織化

3、學(xué)SP法檢測(cè)尿中Survivin蛋白的含量，脫落細(xì)胞中Survivin mRNA的含量、膀胱癌組織及正常膀胱組織中Survivin蛋白的表達(dá)水平，探討Survivin基因與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后等方面的關(guān)系，為膀胱癌的基因診斷及基因治療提供新的途徑和理論依據(jù)。 方法: 1、收集臨床病例材料和正常對(duì)照組材料。取患者尿液和腫瘤組織標(biāo)本，取健康志愿者尿液和正常膀胱粘膜組織標(biāo)本。 2、尿中Survivin蛋白的測(cè)定：采用

4、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法對(duì)患者和健康對(duì)照人群尿液中Survivin蛋白進(jìn)行測(cè)定，并進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。 3、尿脫落細(xì)胞SurVivin mRNA檢測(cè)：采用RT-PCR方法對(duì)患者和健康對(duì)照人群尿脫落細(xì)胞進(jìn)行Survivin mRNA檢測(cè)，并計(jì)算其陽(yáng)性表達(dá)率。 4、組織中SurVivin蛋白的免疫組織化學(xué)檢測(cè)：采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)患者腫瘤組織和正常對(duì)照粘膜組織內(nèi)Survivin蛋白表達(dá)情況，并計(jì)算陽(yáng)性率。 結(jié)果:

5、 1、尿中Survivin蛋白測(cè)定結(jié)果：膀胱移行細(xì)胞癌患者組尿Survivin蛋白含量明顯高于健康對(duì)照組。尿Survivin濃度的高低隨疾病臨床和病理分期的增加而增加。 2、尿脫落細(xì)胞SurVivin mRNA檢測(cè)結(jié)果：膀胱移行細(xì)胞癌患者組尿脫落細(xì)胞Survivin mRNA陽(yáng)性率明顯高于正常對(duì)照組，且陽(yáng)性率和病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。 3、組織中Survivin蛋白的免疫組織化學(xué)檢測(cè)：光鏡下Survivin陽(yáng)性表達(dá)是

6、細(xì)胞漿內(nèi)染成深棕色，伴有胞核染色，低倍和高倍鏡下與背景區(qū)分明確。膀胱移行細(xì)胞癌患者組Survivin蛋白陽(yáng)性率明顯高于正常膀胱粘膜對(duì)照組。 結(jié)論: 1、用RT-PCR法檢測(cè)尿脫落細(xì)胞Survivin mRNA表達(dá)，診斷BTCC敏感性、特異性高，又無(wú)創(chuàng)傷性，因此檢測(cè)尿脫落細(xì)胞中的Survivin mRNA可作為BTCC：的一個(gè)輔助診斷方法。 2、Survivin在正常膀胱粘膜上皮中不表達(dá)，但在膀胱移行細(xì)胞癌中呈高表