小麥-華山新麥草衍生后代紋枯病抗性鑒定與華山新麥草Ns染色體特異SCAR標記開發(fā).pdf

1、華山新麥草（Psathyrostachys huashanica）是小麥重要的野生近緣種之一，具有抗病、抗逆等優(yōu)良性狀，使其成為小麥遠緣雜交育種研究中寶貴的優(yōu)質(zhì)基因來源。
　　本研究利用牙簽嵌入接種法對53份普通小麥和小麥-華山新麥草衍生后代材料進行紋枯病抗性鑒定，并結(jié)合分子細胞學(xué)特征對篩選出的抗病材料進行初步鑒定;利用RAPD標記轉(zhuǎn)SCAR標記技術(shù)和附加有華山新麥草1Ns-7Ns染色體組的小麥-華山新麥草異附加系材料開發(fā)能在小麥

2、背景中對華山新麥草Ns染色體進行識別檢測的特異SCAR標記。實驗獲得如下結(jié)果:
　　1.小麥-華山新麥草衍生后代紋枯病抗性評價與細胞學(xué)鑒定
　　苗期小麥紋枯病人工接種鑒定結(jié)果表明，不同材料對紋枯病的抗性有較大的差異，病情指數(shù)的變異范圍為20.0％-82.0％?？共〉燃壉憩F(xiàn)為抗病(R)及以上的材料11份，占全部供試材料的21.6％，平均病情指數(shù)為26.8％。表現(xiàn)中抗(MR)的材料27份，占全部供試材料的52.9％，平均病情指數(shù)

3、為46.9％。表現(xiàn)中感(MS)或感病(S)的材料13份，占全部供試材料25.5％，平均病情指數(shù)為61.9％。對11份抗病材料進行根尖細胞有絲分裂中期染色體細胞學(xué)觀察，所有材料根尖細胞均含有42條染色體，經(jīng)基因組原位雜交(GISH)鑒定，沒有發(fā)現(xiàn)雜交信號。但抗病材料的農(nóng)藝性狀和其親本7182有顯著的差異，初步分析推斷這些材料為華山新麥草小片段的易位材料并有望在小麥抗紋枯病育種過程中加以利用。
　　2.小麥-華山新麥草附加系RAPD標

4、記擴增的特異片段篩選與SCAR標記轉(zhuǎn)化
　　用180條RAPD隨機引物R1-R180(10 bp)，對附加有華山新麥草1Ns-7Ns染色體組的小麥-華山新麥草異附加系材料進行篩選，有5個RAPD引物分別在1Ns、2Ns、4Ns、5Ns附加系中有特異擴增。對特異片段進行切膠純化，利用分子克隆技術(shù)擴增特異片段并測序。經(jīng)測序得到特異片段的序列，提交NCBI植物基因組數(shù)據(jù)庫中比對，設(shè)計出5對SCAR引物并在材料中進行驗證。新設(shè)計的SCAR