29450.長穗偃麥草e組染色體特異pcr標記開發(fā)

1、揚州大學碩士學位論文長穗偃麥草E組染色體特異PCR標記開發(fā)姓名：張超申請學位級別：碩士專業(yè)：遺傳學指導教師：陳建民20090501揚州人學碩士學位論文理論是相符合的，非同源部分序列則有可能是長穗偃麥草特異的單一序列，推測依據(jù)這樣的序列設計引物就可擴增出該特異片段，直接通過瓊脂糖凝膠電泳觀察，方便快捷，從而將其轉(zhuǎn)化為特異PCR標記。3長穗偃麥草E組染色體特異PCR標記的發(fā)展分別對Z2445、Z21757和Z12325三條片段設計三對引物，

2、引物組合分別編號為5E1、P4和ZCPl，理論擴增片段大小分別為304、329和105bp。利用該三對引物分別對普通小麥中國春、長穗偃麥草、中國春長穗偃麥草二體附加系和相應代換系進行了PCR擴增，結(jié)果顯示擴增片段只出現(xiàn)在長穗偃麥草、中國春長穗偃麥草相對應的二體附加系及代換系，大小與理論值相一致，表明位于5E染色體(Z2445)PA及7E染色體(Z21757、Z12325)上的3個E染色體特異的片段能夠被轉(zhuǎn)換為相對應染色體的特異PCR標記

3、。P4和ZCPI進一步擴增7ES和7EL的端體附加系，又能將Z21757和Z12325這兩個標記進一步定位到7E染色體臂。結(jié)果表明P4、ZCPl兩對引物只在7EL端體附加系中擴增出條帶，即7E染色體長臂特異的PCR標記。對于轉(zhuǎn)化成功的長穗偃麥草5E和7E染色體特異PCR標記，經(jīng)多次驗證重復性好，擴增穩(wěn)定，操作便捷，花費低，尤其適合無相關基因組序列信息的情況下需要發(fā)展分子標記?？梢岳闷鋪龛b定小麥染色體工程育種中的易位系或漸滲系材料中二倍