基于三維細胞模型進行吳茱萸生物堿抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的:1.設計合成10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿。2.基于二維細胞模型和三維細胞模型，研究吳茱萸堿、吳茱萸次堿、10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿等4種生物堿的抗腫瘤活性的異同，探討三維細胞模型在藥物篩選中的可行性。
　　方法:1.通過化學合成的方法合成10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿，然后利用元素分析、紅外光譜、核磁共振光譜及質譜等分析手段對這兩種生物堿衍生物進行

2、了結構表征。2.基于二維細胞模型，采用MTT法檢測4種吳茱萸生物堿對MCF-7人乳腺癌細胞，SMMC-7721人肝癌細胞，SW-1353入骨肉瘤細胞等3種腫瘤細胞的體外增殖抑制情況。計算其抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50)。3.采用hanging drop法構建三維細胞球模型，用相差顯微鏡、SEM掃描電子顯微鏡、倒置顯微鏡及激光共聚焦成像技術等手段，對構建的三維細胞球模型進行形態(tài)學表征，選用Live/Dead Viability/Cyto

3、toxicity試劑盒對三維細胞模型進行活力測試，基于構建的三維細胞球模型進行4種吳茱萸生物堿的抗腫瘤活性實驗，最后采用Live/DeadViability/Cytotoxicity試劑盒測試了吳茱萸堿和吳茱萸次堿作用于三維細胞球模型48h后的細胞活力，計算了抑制率。
　　結果:1.本課題合成了所期望的目標化合物。2.在二維培養(yǎng)體系中，吳茱萸堿、吳茱萸次堿、10-甲氧基吳茱萸次堿和10，11-二甲氧基吳茱萸次堿等4種生物堿對3種腫

4、瘤細胞模型有明顯的抑制作用，且隨藥物濃度的增加，抑制率逐漸增大。3.在三維培養(yǎng)體系中，本課題構建了MCF-7人乳腺癌細胞和SMMC-7721人肝癌細胞的三維細胞球模型，并研究了吳茱萸堿、吳茱萸次堿對這兩種腫瘤細胞球的抑制情況，結果表明，與二維模型相比較，在三維腫瘤細胞球模型中抑制率比較低，這是由于藥物難于滲透到腫瘤球內部的緣故，但是四種化合物對三種腫瘤細胞球的抗增殖抑制情況均呈劑量依賴性關系，與二維模型中的結果一致。
　　結論:該