復(fù)方黃芪顆?？垢卫w維化作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、肝纖維化以細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)在肝臟彌漫性過度沉積為病理特征，其形成主要由于肝星狀細(xì)胞(HSC)活化，ECM過度生成，降解相對(duì)不足，在肝內(nèi)大量沉積所致。因此，抑制HSC活化，減少ECM生成，促進(jìn)ECM的降解就成為阻斷以及逆轉(zhuǎn)肝纖維化的重要環(huán)節(jié)。ECM降解與調(diào)控主要由基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)及其抑制劑(TIMPs)介導(dǎo)，MMPs降解ECM，阻抑肝纖維化發(fā)生，促進(jìn)肝纖維化逆轉(zhuǎn)；TIMPs抑制MMPs，促進(jìn)肝纖維化的形成。大量研究證實(shí)肝纖維

2、化是可以逆轉(zhuǎn)的，特別是近年來廣泛開展的中醫(yī)中藥抗肝纖維化的臨床和實(shí)驗(yàn)研究，取得了較顯著的成果，有著非常廣闊的前景。復(fù)方黃芪顆粒是我科的科研制劑，由黃芪、丹參、制何首烏、地耳草等10味中藥組成，具有健脾補(bǔ)腎、疏肝活血、清熱利濕之功效，臨床觀察能有效地抑制乙肝病毒復(fù)制，改善肝功能，但其有無抗肝纖維化作用及可能的作用機(jī)制，目前國內(nèi)外尚未見有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。為探討其有無抗肝纖維化作用及作用機(jī)制，108只雄性SD大鼠被隨機(jī)分為復(fù)方黃芪顆粒高劑量組(F

3、H)、復(fù)方黃芪顆粒低劑量組(FL)、復(fù)方鱉甲軟肝片治療組(R)、模型組(M)和正常對(duì)照組(C)。除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠采用腹腔內(nèi)注射豬血清法誘導(dǎo)免疫損傷性肝纖維化模型，造模成功后分別給予高、低劑量復(fù)方黃芪顆粒治療，應(yīng)用病理組織學(xué)觀察，結(jié)合ECM特殊染色動(dòng)態(tài)觀察其治療前后組織學(xué)及ECM量的變化，評(píng)估復(fù)方黃芪顆粒的抗肝纖維化療效，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色觀察造模結(jié)束時(shí)以及藥物治療各時(shí)間段肝組織內(nèi)主要MMPs和TIMPs種類，包括MMP-1

4、3、MMP-2、TIMP-1和TIMP-2酶蛋白的表達(dá)量變化，以活化HSC特異性標(biāo)志物a-SMA標(biāo)記顯示活化HSC的變化，并與復(fù)方鱉甲軟肝片治療組和模型組進(jìn)行比較，以探討復(fù)方黃芪顆?？垢卫w維化的可能作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠腹腔內(nèi)注射豬血清10周后，各造模組大鼠肝組織均有明顯的纖維化形成，正常對(duì)照組大鼠肝組織沒有纖維化形成，造模結(jié)束后，M組大鼠肝組織纖維化程度呈進(jìn)行性加重，而FH、FL和R組大鼠肝組織纖維化程度雖在治療第1個(gè)月結(jié)束時(shí)有所加

5、重，但在治療第2個(gè)月結(jié)束時(shí)肝纖維化明顯逆轉(zhuǎn)，治療第3個(gè)月結(jié)束時(shí)，逆轉(zhuǎn)更加明顯(P＜0.01)。M組大鼠肝組織隨纖維化程度呈進(jìn)行性加重，a-SMA、TIMP-1和TIMP-2蛋白表達(dá)呈進(jìn)行性增強(qiáng)，而MMP-13和MMP-2蛋白表達(dá)呈漸進(jìn)性下調(diào)；相對(duì)照，F(xiàn)H、FL和R組在治療第2個(gè)月結(jié)束時(shí)，a-SMA、TIMP-1和TIMP-2蛋白表達(dá)明顯減弱，MMP-13和MMP-2蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)，治療第3個(gè)月結(jié)束時(shí)，一些指標(biāo)上述改變更加顯著，與M組比