賀斯作為5-Fu腹腔化療載體溶液的流體動力學(xué)及藥代動力學(xué)實驗研究.pdf

1、研究背景和目的：胃腸癌是臨床常見的惡性腫瘤，盡管外科手術(shù)方法的不斷改進以及放療、化療、生物免疫療法和中醫(yī)中藥的發(fā)展，但胃腸癌患者的預(yù)后和生存率仍未得到明顯改善，其主要原因是術(shù)后局部復(fù)發(fā)和種植轉(zhuǎn)移至今尚無特別有效的治療措施。胃腸惡性腫瘤常見的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移部位依次是切除部位、腹膜表面和肝臟，腹腔化療針對其這一生物學(xué)行為，使抗癌藥物直接作用于腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移部位，為腹腔惡性腫瘤的輔助治療提供了一種新的途徑，現(xiàn)已成為腹腔惡性腫瘤尤其是胃腸惡性腫瘤

2、術(shù)后局部復(fù)發(fā)和種植轉(zhuǎn)移的重要的防治措施。然而腹腔化療尚存在兩大問題：其一為抗癌藥的穿透性問題；其二是能保持恒定持久高濃度的腹腔化療載體問題。腹腔化療的療效不僅取決于化療藥物，還取決于所選擇的載體溶液。理想的載體溶液應(yīng)能持久保持大容積的化療液，保持恒定高濃度的化療藥物并使之均勻分布于腹膜及腹腔臟器表面。目前腹腔化療最常用的載體溶液為等滲小分子溶液，如生理鹽水，但這種載體可被腹膜迅速吸收，很大程度上限制了腹腔化療的療效，并不能很好地減少化療

3、藥物的系統(tǒng)毒性。國外學(xué)者初步證實中、大分子量載體溶液與小分子量載體相比有諸多優(yōu)勢，但尚未研究出切實有效能在臨床廣泛應(yīng)用的載體溶液。賀斯(HAES—steri)是一種中分子量、低取代極的新一代羥乙基淀粉，目前廣泛用于臨床擴容治療，根據(jù)其能持久擴容的特性及國外同類載體的研究，有望成為較為理想的腹腔化療載體溶液。本研究擬在大鼠體內(nèi)研究其作為5-Fu腹腔化療載體溶液的流體動力學(xué)及藥代動力學(xué)，并與傳統(tǒng)載體溶液生理鹽水及1.5％葡萄糖腹膜透析液加以

4、比較，探討其作為新型腹腔化療載體溶液的流體動力學(xué)、藥代動力學(xué)優(yōu)勢及可行性。方法1、選用HPLC法測定大鼠血漿、腹腔液及主要臟器組織中5-Fu濃度，建立色譜分析條件及5-Fu在腹腔液、血漿、胃、結(jié)腸、肝臟、腎、肺組織中的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2、Sprague—Dawley(SD)大鼠隨機分為生理鹽水組、1.5％葡萄糖腹膜透析液組及賀斯組，每一組再隨機分為1h、3 h、6 h、12 h、18 h、24 h時間點組，每一時間點5只。

5、3、各組以相應(yīng)的溶液作為5-Fu載體行腹腔化療，觀察給藥后大鼠的行為，在相應(yīng)時間點經(jīng)吸入麻醉后，采用腹正中切口，抽盡腹腔液并作以記錄；抽取門靜脈及下腔靜脈血各2ml，依次取出結(jié)腸、胃、腎、肝及肺臟。 4、所取樣品經(jīng)預(yù)處理后，用HPLC法測定其中5-Fu濃度。 5、計算流體動力學(xué)及藥代動力學(xué)參數(shù)，并繪制平均藥時曲線。 6、應(yīng)用DAS 2.0軟件進行藥代動力學(xué)處理；應(yīng)用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理；

6、以Mcrosoft Excel，Origin Pro 7.5作為繪圖軟件。 結(jié)果 1、在排除生物樣品雜質(zhì)干擾的色譜條件下，得5-Fu血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=26.2180A/Ais-0.09966，r=0.9998，線性范圍：0.001μg/ml～10μg/ml。得5-Fu生理鹽水腹腔液標(biāo)準(zhǔn)曲線為①C=28.4286A/Ais-2.2667，r=0.9988，線性范圍：0.001μg/ml～50 μg/ml；②C=65.491

7、1A/Ais-58.7932，r=0.9989，線性范圍：50μg/ml～2000μg/ml。得5-Fu 1.5％含糖腹膜透析液腹腔液標(biāo)準(zhǔn)曲線為①C=29.3152A/Ais-3.4561，r=0.9988，線性范圍：0.001μg/ml～50μg/ml；②C=65.68472A/Ais-67.9876，r=0.9994，線性范圍：50μg/ml～2000μg/ml。得5-Fu賀斯腹腔液標(biāo)準(zhǔn)曲線為①C=29.5754A/Ais-3.79

8、76，r=0.9994，線性范圍：0.001 μg/ml～50μg/ml；②C=66.5292A/Ais-89.8926，r=0.9995，線性范圍：50μg/ml～2000μg/ml。得5-Fu胃組織標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=29.0487A/Ais-3.2353，r=0.9991，線性范圍：0.001μg/ml～50μg/ml。得5-Fu結(jié)腸組織標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=24.9276A/Ais-1.2175，r=0.9997，線性范圍：0.001μg/m

9、l～50μg/ml。得5-Fu肝臟組織標(biāo)準(zhǔn)曲線為C=25.4524A/Ais-0.0135，r=0.9999，線性范圍：0.001μg/ml～50μg/ml。得5-Fu腎組織標(biāo)準(zhǔn)曲線為c=25.7613A/Ais-0.3486，r=9994，線性范圍：0.001μg/ml～50μg/ml。得5-Fu肺組織標(biāo)準(zhǔn)曲線為c=28.1921A/Ais-0.2214，r=0.9998，線性范圍：0.001 μg/ml～50μg/ml。2、賀斯組、

10、生理鹽水組和1.5％葡萄糖腹膜透析液組，給藥后大鼠行為無顯著性組間差異(P=0.843)。 3、得出三種載體溶液主要流體及藥代動力學(xué)參數(shù)。 4、流體動力學(xué)結(jié)果：在3h、6 h、12h時間點，賀斯組腹腔內(nèi)清除率均顯著小于腹透液組(P值均為0.009)；在1 h、6 h時間點，賀斯組清除率顯著小于生理鹽水組(P值分別為0.047、0.009)；在1 h、3 h、6 h、時間點，賀斯組腹腔內(nèi)存留率均顯著大于腹透液組(P值分別為

11、0.047、0.028、0.009)；在1 h、6 h、12 h、18 h時間點，賀斯組存留率顯著大于生理鹽水組(P值分別為0.047、0.009、0.005、0.005)；在24 h時間點，賀斯組腹腔內(nèi)平均存留率為4.2％，在12 h時間點，1.5％葡萄糖腹膜透析液組無腹腔液存留，在18 h時間點，生理鹽水組無腹腔液存留。 5、藥代動力學(xué)結(jié)果：在3 h、6 h、12 h時間點，賀斯組腹腔液中5-Fu濃度顯著高于生理鹽水(P值分

12、別為0.009、0.009、0.005)；在3 h、6 h時間點，賀斯組腹腔液5-Fu濃度顯著高于1.5％葡萄糖腹膜透析液組(P值分別為0.009，0.009)，12 h時1.5％葡萄糖腹膜透析液組已無腹腔液存留，18h時生理鹽水組已無腹腔液存留，在18 h、24 h時間點，賀斯組腹腔液5-Fu平均濃度分別為4.7724μg/ml、0.8106μg/ml；在3 h、12 h、18 h、24 h時間點，賀斯組門靜脈中5-Fu濃度顯著高于生

13、理鹽水組(P值分別為0.009、0.034、0.005、0.019)；在3 h、24 h時間點，賀斯組門靜脈中5-Fu濃度顯著高于1.5％葡萄糖腹膜透析液組(P值分別為0.047，0.019)；在3h、18 h時間點，賀斯組胃組織中5-Fu濃度顯著高于1.5％葡萄糖腹膜透析液組(P值分別為0.028、0.016)；在18 h時間點，賀斯組胃組織中5-Fu濃度顯著高于生理鹽水組(P=0.016)；在18 h、24 h時間點，賀斯組結(jié)腸組織

14、中5-Fu濃度顯著高于1.5％葡萄糖腹膜透析液組(P值分別為0.028，0.005)；在18 h賀斯組結(jié)腸組織中5-Fu濃度顯著高于生理鹽水組(P=0.09)；在3 h、6 h、18 h、24 h時間點，賀斯組肝臟組織中5-Fu濃度顯著高于1.5％葡萄糖腹膜透析液組(P值分別為0.009、0.013、0.007、0.005)：在3 h、6 h、12 h、24 h時間點，賀斯組肝臟組織中5-Fu濃度顯著高于生理鹽組(P分別為0.009、0

15、.013、0.034、0.013)；在各時間點，三組間下腔靜脈血中及腎組織中5-Fu濃度均無顯著性差異；在18 h時間點，賀斯組肺組織中5-Fu濃度顯著高于生理鹽水組(P=0.034)。結(jié)論1、本研究建立的測定SD大鼠血漿、腹腔液及主要臟器組織中5-Fu含量的高效液相色譜法，血清和組織中雜質(zhì)峰不干擾5-Fu的測定；提取回收率較高、敏感度高、特異性強，預(yù)處理簡單省時，適于研究5-Fu藥代動力學(xué)。 2、以賀斯為載體在大鼠體內(nèi)行腹腔化