轉(zhuǎn)耐鹽相關(guān)基因山新楊的抗逆性分析.pdf

1、利用農(nóng)桿菌(A tumefaciens)介導(dǎo)法將從抗旱、耐鹽植物檉柳（Tamarix chinensis）中克隆得到的lea基因（late embryogenesis abundant）轉(zhuǎn)入山新楊，共獲得18個(gè)卡那霉素抗性芽，對(duì)其進(jìn)行PCR檢測(cè)，均為陽(yáng)性;RT-PCR檢測(cè)，表明外源lea基因在RNA水平上能夠表達(dá)。
　　將轉(zhuǎn)3種基因的山新楊進(jìn)行0.8％的NaCl脅迫，對(duì)轉(zhuǎn)基因株系和對(duì)照的丙二醛含量，葉綠素含量以及過(guò)氧化物歧化酶(S

2、OD)，過(guò)氧化物酶(POD)，抗血酸過(guò)氧化物酶(APX)，過(guò)氧化氫酶(CAT)等抗氧化酶的活性進(jìn)行了測(cè)定。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明:在脅迫的第4d和第6d轉(zhuǎn)基因株系的葉綠素平均含量分別高于對(duì)照的14.28％和16.42％。
　　非轉(zhuǎn)基因小黑楊的MDA含量高于脅迫前的7.74％，各轉(zhuǎn)基因山新楊的平均MDA含量均高于脅迫前的1.69％;脅迫第6d非轉(zhuǎn)基因小黑楊的MDA含量最高，高于脅迫前的87.31％，各轉(zhuǎn)基因山新楊的平均MDA含量高

3、于脅迫前的60.63％。
　　轉(zhuǎn)基因山新楊的4種抗氧化酶活性分析結(jié)果如下：
　　(1) APX活性分析表明，鹽脅迫的第2d各轉(zhuǎn)基因株系的APX活性達(dá)到最大，其中L15和A11植株內(nèi)的APX活性明顯高于對(duì)照，分別高于對(duì)照的63.09％和48.85％;
　　(2) POD活性分析表明，在脅迫的第4d和第6d，轉(zhuǎn)基因株系L10，P6，P8的POD活性分別高于對(duì)照的37.34％，28.39％，28.99％，而在脅迫6d時(shí)這些轉(zhuǎn)

4、基因株系的POD活性則分別高于對(duì)照的38.6％，19.48％，19.34％。
　　(3) SOD活性分析表明，在脅迫第6d，L15，P1和P8的SOD活性顯著的高于對(duì)照，分別高于對(duì)照的26.36％，27.31％，17.33％。
　　(4) CAT活性分析表明，在脅迫的第2d，各轉(zhuǎn)基因株系的CAT活性(除了A18)均明顯高于對(duì)照，但在脅迫第4d和6dL15和L14的CAT活性高于對(duì)照。
　　采用隸屬函數(shù)法，利用4種抗氧化