慢性阻塞性肺疾病相關性肺動脈高壓患者血清及外周血單核細胞Rho激酶水平測定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定不吸煙的健康人、吸煙但肺功能正常人群及COPD相關肺動脈高壓患者血清、外周血單核細胞中Rho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)水平,比較三組研究對象血清、外周血單核細胞中ROCK1中的表達規(guī)律,探討Rho/Rho激酶信號通路在COPD相關肺動脈高壓中的作用。
   方法:
   1.研究對象
   選取2010年12月至2011年4月在長沙市三醫(yī)院呼吸內科住院的慢性阻

2、塞性肺疾病(COPD)相關性肺動脈高壓患者10人(男性6名,女性4名,平均年齡65.4±8.0歲)(C組),同期在長沙市三醫(yī)院體檢的健康不吸煙者10人(男性5名,女性5名,平均年齡62.5±7.0歲)(A組),以及吸煙肺功能正常者10人(男性7名,女性3名,平均年齡63.7±9.0歲)(B組)。其中C組病人同時符合中華醫(yī)學會呼吸分會2007年制定的(慢性阻塞性肺疾病診治指南)的診斷標準及ESC2009年制定的(肺動脈高壓診斷與治療指南)

3、的診斷標準。三組在年齡、性別、體重上盡量匹配。
   2.肺功能測定
   所有研究對象均進行肺功能測定,主要測定指標為用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼氣容積(FEV1)、FEV1/FVC及FEV1占預計值的百分比(FEV1%)。吸入支氣管擴張劑(沙丁胺醇400ug)后FEV1/FVC仍低于70%,且經超聲心動圖證實有肺動脈高壓者為C組納入標準。肺功能正常者根據(jù)是否吸煙分至B組或A組。
   3.肺動脈收縮壓的

4、測定
   所有研究對象均通過超聲心動圖測定安靜狀態(tài)下肺動脈收縮壓(PASP)。
   4.血清Rho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)水平測定
   ①標本采集:抽取各研究對象空腹靜脈血3ml,離心(3000R/15min20℃)留取上層血清1ml,存放于-80℃低溫冰箱中待測。
   ②測定方法:血清Rho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)水平檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),其中標本處理

5、、測定方法和樣本濃度計算均按相關試劑盒說明書進行。
   5.外周血單核細胞中Rho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK1)水平測定
   ①標本采集:抽取各研究對象空腹靜脈血20ml,以percoll非連續(xù)密度梯度離心沉降法分離單個核細胞,并培養(yǎng)使單核細胞貼壁。再用細胞刮輕輕刮下,存放于-80℃低溫冰箱中待測。
   ②測定方法:將單核細胞收集后以反復凍融法裂解,離心后取上清液采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測單

6、核細胞中ROCK1水平。其中標本處理、測定方法和樣本濃度計算均按相關試劑盒說明書進行。
   結果
   1.三組研究對象中C組肺動脈收縮壓顯著高于A組與B組,有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)。B組肺動脈收縮壓高于A組,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
   2.三組研究對象中C組血清ROCK1水平高于A組,兩者之間有統(tǒng)計學差異(P<0.05);C組血清ROCK1水平高于B組,兩者之間有統(tǒng)計學意義(P<0.05);A

7、組與B組之間血清ROCK1水平無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
   3.三組研究對象中C組外周血單核細胞中ROCK1水平高于A組,兩者之間有統(tǒng)計學差異(P<0.05);C組外周血單核細胞中ROCK1水平高于B組,兩者之間有統(tǒng)計學意義(P<0.05);A組與B組之間外周血單核細胞中ROCK1水平無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
   4.三組研究對象中C組單核細胞計數(shù)高于A、B兩組,有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  

8、 5.三組研究對象中血清ROCK1水平與肺動脈收縮壓呈正相關關系(r=0.736,P<0.05);外周血單核細胞中ROCK1水平與肺動脈收縮壓呈正相關關系(r=0.661,P<0.05)。
   結論
   1.三組研究對象中COPD相關肺動脈高壓患者血清及外周血單核細胞中ROCK1水平較其它兩組高,提示Rho激酶在肺動脈高壓發(fā)病機制中具有重要意義,血清及單核細胞中ROCK1水平可能反應COPD相關肺動脈高壓患者的病情

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