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文檔簡介
1、自噬的蛋白降解可以維持體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝平衡,它是細胞對于環(huán)境變化的有效反應(yīng),在新陳代謝方面上,具有重要的生理意義,同時,自噬還存在于正常的生理現(xiàn)象中,是細胞防御一切惡劣環(huán)境的一種重要機制,并參與許多種生理疾病。本實驗主要通過建立小鼠骨骼肌萎縮的模型,并給予針刺治療,來探究針刺治療骨骼肌萎縮的分子機制。
本實驗購置的小鼠為昆明小鼠,飼養(yǎng)一周后進行隨機分配并分籠單獨喂養(yǎng),組別分別為:對照組(C)、針刺組(AP)、懸吊組(SP)和懸
2、吊+針刺組(SP+AP)。通過小鼠尾部懸吊的方法來建立小鼠骨骼肌萎縮的模型。在模型建立期間,開始每天對針刺組(AP)和懸吊+針刺組(SP+AP)小鼠進行針刺治療。穴位的選取為環(huán)跳穴、足三里穴和承山穴,行針手法采用平補平瀉(其手法柔和,深透有力,均勻協(xié)調(diào),刺激較小)。針刺時間為20分鐘,行針頻率為每5分鐘行針一次。經(jīng)過兩周的造模后,進行單后肢的肌力檢測和骨骼肌的取材,取材部位為脛骨前肌和腓腸肌,最后通過Western blot檢測方法來檢
3、測骨骼肌內(nèi)自噬、線粒體融合與分裂等相關(guān)蛋白水平。
實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),懸吊組(SP)與對照組(C)相比,肌肉重量明顯下降,懸吊+針刺組(SP+AP)通過針刺后,可緩解肌肉重量的快速下降,針刺組(AP)肌肉重量沒有顯著性變化。在檢測肌力方面,懸吊組(SP)與對照組(C)相比,肌力明顯下降,懸吊+針刺組(SP+AP)與對照組(C)相比,肌力沒有顯著性差異,針刺組(AP)肌力沒有顯著性變化。此外,本實驗通過采用Western blot檢測
4、方法來檢測自噬、線粒體融合與分裂等相關(guān)蛋白水平的變化,研究發(fā)現(xiàn),懸吊組(SP)小鼠 LC3Ⅱ、AMPK、Akt、FoxO3a磷酸化含量均有所下降,而懸吊+針刺組(SP+AP)小鼠相關(guān)蛋白卻有顯著的升高,針刺組(AP)小鼠相關(guān)蛋白含量沒有顯著變化。
通過以上實驗研究的結(jié)果,說明針刺能夠減緩懸吊后造成的骨骼肌萎縮,緩解其肌力的嚴重丟失,但仍不能恢復(fù)到正常的狀態(tài)。針刺能夠緩解骨骼肌萎縮的分子機制可能與自噬溶酶體途徑、IGF-1/PI
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