三聚氰胺對雄性小鼠生殖毒性的實驗研究.pdf

1、目的：
　　初步探討三聚氰胺對雄性小鼠的生殖毒性及其毒性作用機制。
　　方法：
　　健康雄性昆明種小鼠50只，隨機分為5組，每組10只，分別為生理鹽水陰性對照組；三聚氰胺低、中、高劑量組:400、800、1600mg/(kg.d);環(huán)磷酰胺陽性對照組。各實驗組小鼠連續(xù)給藥5天，于首次染毒后的第35天處死。1.稱量小鼠睪丸、附睪，計算臟器系數(shù)；2.顯微鏡下計數(shù)精子數(shù)量、精子活動率、精子畸形率；3.化學(xué)發(fā)光法測定小鼠睪酮（

2、T）；4.比色法測定并計算小鼠睪丸組織超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量及山梨醇脫氫酶（SDH）、乳酸脫氫酶（LDH）活力；5.睪丸病理切片HE染色，觀察小鼠睪丸組織的病理學(xué)改變；6.流式細胞儀檢測小鼠睪丸生精細胞凋亡率。7.免疫組化法檢查凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表達。
　　結(jié)果：
　　1.三聚氰胺各劑量染毒組睪丸臟器系數(shù)下降，其中，中、高劑量組與陰性對照組比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

3、＜0.01）；附睪臟器系數(shù)也下降，高劑量組與陰性對照組比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.隨著染毒劑量的增加，精子數(shù)量及精子活動率呈下降趨勢，精子畸形率呈上升趨勢，與陰性對照組比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。
　　3.各實驗組睪酮水平升高，中劑量組與陰性對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.隨著三聚氰胺染毒劑量的增加，SOD活力下降，各劑量組與陰性對照組相比，差異均有

4、統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；MDA含量上升，其中低劑量組與陰性對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），SDH活力呈下降趨勢，各劑量染毒組與陰性對照組比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01/P＜0.05）；LDH活力呈下降趨勢，高劑量組與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　5.睪丸組織病理學(xué)切片可見三聚氰胺各劑量組睪丸曲細精管排列紊亂、松散，各級生精細胞明顯減少。
　　6.凋亡：三聚氰胺各實驗組細胞凋亡率

5、呈上升趨勢，其中高劑量組與陰性對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。
　　7.三聚氰胺各劑量組Bcl-2表達呈下降趨勢，與陰性對照組比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；Bax、Caspase-3表達均呈上升趨勢，中、高劑量組與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1．三聚氰胺對雄性昆明鼠有一定的生殖毒性作用
　　2．其毒性作用主要表現(xiàn)為：睪丸、附睪臟器系數(shù)下降；精液質(zhì)量下降