細胞外熱休克蛋白70在嚴重?zé)齻笫竽c粘膜的表達變化及其對腸道T細胞免疫功能的影響.pdf

1、目的:觀察嚴重?zé)齻笫竽c粘膜組織細胞外熱休克蛋白70及IL-2表達變化情況,另外分離嚴重?zé)齻蟠笫竽c道淋巴結(jié)CD3+T細胞,予以細胞外HSP70(eHSP70)刺激體外培養(yǎng),以此來探討eHSP70對腸道T細胞免疫的影響。
　　方法:把60只健康雄性SD大鼠,隨機分成正常對照組和燒傷后3小時、6小時、12小時、24小時、48小時組,每組各10只,用控時控溫控壓蒸汽燙傷儀在每只燙傷組大鼠背部造成全身體表面積為30％的III度燒傷,于各

2、時相點頸椎脫臼處死SD大鼠,提取腸粘膜組織,采用ELISA方法檢測eHSP70和IL-2的表達變化。采用流式細胞分選技術(shù)分選嚴重?zé)齻?2h后雄性SD大鼠腸道淋巴結(jié)CD3+T細胞,將體外培養(yǎng)的CD3+T細胞隨機分成空白對照組和eHSP70低濃度、中濃度、高濃度刺激組共4組。其中空白對照組不加eHSP70,低、中、高濃度組分別加入終濃度為5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的eHSP70,采用流式細胞技術(shù)檢測Th1/Th2細胞比例及

3、CD3+T細胞凋亡率;采用ELISA方法檢測IL-2和IL-10在培養(yǎng)液上清中的表達變化。
　　結(jié)果:
　　(1)大鼠燒傷后各時相點腸粘膜eHSP70的表達均降低,與正常對照組(1278±327.3)比較,燒傷后3h(538±40.4)大鼠腸粘膜eHSP70表達已經(jīng)下降,燒傷后12h(314±20.5)達到最低值,約為正常對照組的1/4,在燒傷后24h(528±40.4)后表達開始逐步回升,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)

4、。
　　(2)與正常對照組(48.63±7.89)比較,各燙傷組大鼠腸粘膜IL-2的表達均降低,于燒傷后12h(25.36±8.58)達到最低值,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　(3嚴重?zé)齻笫竽c粘膜 eHSP70和 IL-2相對表達量呈正相關(guān)r=0.920,p<0.01。
　　(4)與空白對照組比較,eHSP70刺激組Th1的比例均增高,而Th2的比例均降低,并均以終濃度為10μg/ml的中濃度組表現(xiàn)最明顯,

5、差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　(5)與空白對照組比照,eHSP70刺激組的CD3+T細胞總凋亡率均下降,其中終濃度為10μg/ml的中濃度組凋亡率最低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　(6)與空白對照組比較,eHSP70刺激組的IL-2表達均增加,其中終濃度為10μg/ml的中濃度組增加最明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);而eHSP70刺激組中IL-10與空白對照組比較表達均無明顯變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意