血管內(nèi)皮生長因子反義寡核苷酸對白血病細胞系HL60細胞作用的研究.pdf

1、目的：本試驗研究旨在探討VEGFASODN抑制內(nèi)源性VEGFmRNA的表達效果；VEGFASODN與白血病細胞凋亡的關(guān)系；VEGFASODN與VP16聯(lián)合作用白血病細胞的效應是否有相加作用?！　〔牧吓c方法：1.白血病細胞系HL60由鄭州大學醫(yī)學院組胚教研室提供。2.試驗分為VEGFASODN組、VEGF錯義寡核苷酸序列(VEGFMSODN)和空白對照組(前兩組又各含5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L三組濃度)，用陽離子

2、脂質(zhì)體介導硫代修飾VEGF寡核苷酸(VEGFODN)轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)白血病細胞系HL60細胞后，采用MTT法分別在24h、48h檢測各組細胞的增殖抑制率，并找出VEGFASODN轉(zhuǎn)染最適作用時間和最適作用濃度。3.應用20μmol/L的VEGFODN轉(zhuǎn)染HL60細胞，在孵育48h后進行逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(RT-PCR)分別檢測VEGFASODN組、VEGFMSODN組及空白對照組的VEGFmRNA表達水平；4.細胞凋亡檢測：細胞形態(tài)學觀察

3、凋亡小體；凋亡細胞DNA梯形帶；流式細胞儀(FCM)AnnexinV-FITC/PI檢測細胞凋亡。5.聯(lián)合應用VEGFASODN和5μg/L、10μg/L、20μg/L三種濃度的VP16作用于HL-60細胞，采用FCMAnnexinV-FITC/PI檢測細胞凋亡率。6.所得結(jié)果運用SPSS10.0統(tǒng)計學軟件包處理，統(tǒng)計學數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(-x±s)表示。多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析。方差不齊時進行變量轉(zhuǎn)換?！　〗Y(jié)論：　　1.V