多波長激光誘導(dǎo)豚鼠形覺剝奪性高度近視脈絡(luò)膜新生血管模型建立的研究.pdf

1、目的：探討多波長激光誘導(dǎo)的形覺剝奪性高度近視豚鼠脈絡(luò)膜新生血管模型建立的可行性。
　　方法：1.多波長激光擊破Bruch’s膜：3周大雄性雙眼屈光參差大于6.00D三色豚鼠9只（18眼）分為激光后7d,14d,28d三組，雙眼A-Scan測量眼軸，取每只鼠近視屈光度更高眼作為實驗眼，另一側(cè)眼為對照眼。采用多波長激光（532nm）擊破Bruch’s膜對豚鼠雙眼行視網(wǎng)膜光凝，激光功率、光斑直徑、曝光時間分別為400mW、50μm、0.

2、1s，每只眼在視盤上方行8個光凝斑點。于光凝后三個時間點行眼底彩照和吲哚青綠血管造影（indocyaninegreenangiography,ICGA），檢查后處死豚鼠，摘取眼球制作標(biāo)本，進(jìn)行脈絡(luò)膜鋪片及組織病理學(xué)觀察。
　　2.多波長激光不擊破Bruch’s膜：3周大雄性雙眼屈光參差小于2.00D三色豚鼠30只，在右眼面罩法形覺剝奪誘導(dǎo)近視6周后，多波長激光（532nm）不擊破Bruch’s膜雙眼光凝，分為光凝后7d,14d,2

3、8d三組，激光功率為120mW，直徑200μm，曝光時間為0.1s，每只眼在視盤上方行10個光凝斑點。各組分別于光凝后三個時間點行眼底彩照和ICGA，檢查后處死豚鼠，摘取眼球制作標(biāo)本，進(jìn)行脈絡(luò)膜鋪片及組織病理學(xué)觀察，并通過免疫組化等分子生物學(xué)方法分析VEGF，MMP-2等因子在實驗眼和對照眼視網(wǎng)膜等組織的蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1.光凝后7d出現(xiàn)CNV，14d達(dá)高峰，28d出現(xiàn)瘢痕化。以ICGA激光斑熒光充盈為準(zhǔn)，14天時造模成

4、功率為66.7％，且此時光鏡下可見視網(wǎng)膜下CNV形成，脈絡(luò)膜鋪片可見激光斑邊緣呈網(wǎng)簇狀高熒光斑，半定量分析三個時間點CNV面積，實驗眼CNV面積均大于對照眼，且14d時，實驗眼CNV面積最大，28d時，雙眼CNV面積均減小。
　　2.面罩法形覺剝奪4周后誘導(dǎo)出>-6.00D的近視，戴面罩眼眼軸較對照組明顯增長，且主要是玻璃體腔延長。激光光凝后，ICGA三個時間點激光斑均可見；脈絡(luò)膜鋪片和光鏡下均可見在視網(wǎng)膜下7d出現(xiàn)CNV，14d

5、CNV達(dá)高峰，28d出現(xiàn)瘢痕化；免疫組化結(jié)果顯示形覺剝奪眼VEGF在脈絡(luò)膜毛細(xì)血管處高表達(dá)，MMP-2在視網(wǎng)膜色素上皮層處表達(dá)更多。
　　結(jié)論：多波長激光擊破Bruch’s膜可以誘導(dǎo)豚鼠CNV，并且屈光度高的豚鼠實驗眼CNV面積比屈光度低的對照眼大，可能是由于屈光度高的實驗眼眼軸增長導(dǎo)致視網(wǎng)膜變薄，從而為新生血管生長提供了更多的缺血缺氧等條件。多波長激光不擊破Bruch’s膜可以在已經(jīng)誘導(dǎo)出高度近視的豚鼠眼上誘導(dǎo)出CNV，VEGF