安徽宣城敬亭山地區(qū)利用白僵菌持續(xù)控制松褐天牛的研究.pdf

1、本文研究了在安徽省敬亭山地區(qū)利用球孢白僵菌無紡布菌劑與引誘劑聯(lián)合持續(xù)控制松褐天牛的效果。在菌種離子注入誘變、引誘劑篩選及無紡布菌劑與引誘劑的聯(lián)合應(yīng)用技術(shù)等方面進(jìn)行了綜合研究后，提出了利用無紡布菌劑持續(xù)控制松褐天牛的措施。 白僵菌的離子注入誘變育種是利用低能N+離子注入技術(shù)來選育高毒力白僵菌變異菌株。在不同劑量的N+注入球孢白僵菌后，孢子存活率曲線呈典型的“馬鞍型”劑量-效應(yīng)曲線。選擇存活曲線峰值區(qū)域所對(duì)應(yīng)的注入劑量80×1.3×

2、1014ions/cm2為誘變育種的最佳注入劑量。通過比較離子注入前后不同菌株的產(chǎn)酶曲線發(fā)現(xiàn)：不同菌株之間的Pr1蛋白酶酶活存在著差異，但是其酶活曲線變化規(guī)律一致：24h時(shí)酶活最大，以后逐漸減小。離子注入前后菌株產(chǎn)酶曲線變化一致，表明離子注入沒有改變白僵菌Pr1蛋白酶的產(chǎn)酶過程，故選擇24h作為最佳誘導(dǎo)時(shí)間。通過菌株產(chǎn)孢量與菌株P(guān)r1蛋白酶酶活雙重指標(biāo)對(duì)菌株進(jìn)行篩選，Bb202IP50菌株在兩個(gè)指標(biāo)上表現(xiàn)均較好，產(chǎn)孢量達(dá)到(7.1±1.

3、1)×108孢子/cm2，Pr1蛋白酶A405達(dá)到了0.27±0.03。變異菌株經(jīng)繼代培養(yǎng)10代后，第10代菌株產(chǎn)孢量達(dá)(6.3±0.6)×108個(gè)孢子/cm2，各代之間差異不顯著，產(chǎn)孢穩(wěn)定；第10代Pr1蛋白酶的產(chǎn)量與第1、3代之間存在顯著差異，與其它代菌株間差異不顯著。因此，N+低能離子注入能夠有效提高球孢白僵菌菌株的產(chǎn)孢量及Pr1蛋白酶的產(chǎn)量，且菌株遺傳穩(wěn)定，是一種比較理想的菌種誘變育種技術(shù)。 在引誘劑篩選研究中，比較了M

4、a02、Ma03、Ma04及M99四種引誘劑的對(duì)松褐天牛的引誘效率。整個(gè)試驗(yàn)期間，Ma02與M99對(duì)松褐天牛成蟲的引誘量分別為18±2.3、16±6.2只/籠，顯著高于另外兩種引誘劑。對(duì)各種引誘劑誘獲的松褐天牛雌成蟲進(jìn)行了解剖發(fā)現(xiàn)，引誘劑M99誘得的雌成蟲的懷卵率為100％，Ma02為61.4％，遠(yuǎn)比其它三種引誘劑低。對(duì)引誘劑Ma02的引誘距離研究中，0m、30m和50m三個(gè)距離上的引誘量之間差異不顯著，但卻極顯著地高于70m的引誘量。

5、在70m處的引誘量極小，說明引誘劑Ma02有效距離為50m，覆蓋范圍為約0.8公頃。因此在實(shí)際應(yīng)用中，可設(shè)50m為布置誘捕器的距離。另外，通過對(duì)各處理區(qū)的松褐天牛種群監(jiān)測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析，可以看出，誘芯和誘木對(duì)天牛成蟲的誘集的效果是不一樣的，在短時(shí)期內(nèi)誘芯的誘集量較誘木少，但是誘芯持續(xù)性強(qiáng)，所以誘芯+誘木+無紡布菌條三者有機(jī)組合能夠達(dá)到較為理想的防治效果。 試驗(yàn)還利用選擇性培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)平板技術(shù)監(jiān)測(cè)林間白僵菌種群密度與傳播能力，結(jié)果顯示

6、：在處理區(qū)中心區(qū)域的平均孢子密度為1.6×105CFU/m2/d。隨著距離的增加，孢子密度逐漸降低。孢子在林間的空間分布與風(fēng)向與風(fēng)速有密切的關(guān)系，順風(fēng)方向孢子密度較大，逆風(fēng)方向較低，60m以外用標(biāo)準(zhǔn)平板不能監(jiān)測(cè)到白僵菌。放菌半年內(nèi)連續(xù)監(jiān)測(cè)林間白僵菌動(dòng)態(tài)，發(fā)現(xiàn)在剛放菌的1個(gè)月之內(nèi)，林間的帶菌量較高，之后的幾個(gè)月空氣中白僵菌帶菌量明顯變小。在整個(gè)防治松褐天牛期間，林間空氣中白僵菌孢子密度保持1000CFU/m2/d以上，使得白僵菌通過空氣傳

7、播感染松褐天牛成為可能。 為檢測(cè)白僵菌對(duì)松褐天牛成蟲的控制效果，本文做了將健康成蟲引入無紡布菌劑處理區(qū)掛籠飼養(yǎng)(以下簡(jiǎn)稱引入天牛)及將無紡布菌劑處理區(qū)帶菌成蟲引出到未放菌區(qū)飼養(yǎng)(以下簡(jiǎn)稱引出天牛)兩個(gè)處理。放菌10天后引入天牛在不同處理區(qū)內(nèi)的感染率差異不顯著(分別為33.3％和26.7％)，與對(duì)照區(qū)的感染率(0％)存在顯著差異。引入天牛的感染率隨放菌時(shí)間的延長(zhǎng)而下降。放菌20天后，處理區(qū)引出天牛感染率為40％，與對(duì)照區(qū)(0％)差

8、異顯著。隨著放菌時(shí)間的延長(zhǎng)，處理區(qū)引出天牛的感染率下降。和感染率一樣，放菌區(qū)與對(duì)照區(qū)天牛成蟲壽命也存在顯著差異。放菌10天后引入天牛的平均壽命為10天，顯著較對(duì)照區(qū)(16.3天)短，放菌40天后引入天牛的平均壽命為8.6天，對(duì)照區(qū)天牛平均壽命為14.2天。處理區(qū)引出天牛平均壽命與對(duì)照區(qū)存在顯著差異：放菌20d后引出的天牛壽命為5.4天，遠(yuǎn)比對(duì)照區(qū)(16.3天)短，放菌40d后引出天牛飼養(yǎng)，平均壽命在10d以上。 調(diào)查白僵菌對(duì)引入

9、天牛幼蟲的影響發(fā)現(xiàn)：3區(qū)和5區(qū)侵入孔抑制率分別達(dá)到了50.0％、54.4％，幼蟲抑制率分別達(dá)到了41.0％、35.9％，幼蟲感染率分別達(dá)到了25.3％、27.9％。這驗(yàn)證了白僵菌無紡布菌劑對(duì)松褐天牛幼蟲的控制作用。 從死樹率指標(biāo)來看，2004年及2005年各處理區(qū)死樹率都有所下降，2005年在4個(gè)放菌區(qū)內(nèi)死樹率接近于0。放菌兩年后，4區(qū)和5區(qū)死樹減退率均達(dá)到了100％，與對(duì)照區(qū)存在著顯著差異。 比較了宣城敬亭山2004年