模擬微重力效應(yīng)對人牙周膜干細胞凋亡及細胞骨架結(jié)構(gòu)及基因表達的影響.pdf

1、人類在太空失重狀態(tài)下，機體發(fā)生多種變化，航天員骨礦物質(zhì)呈進行性、持續(xù)性的丟失以致出現(xiàn)不同程度的骨強度下降，而口頜系統(tǒng)作為人體非常重要的器官，其功能、結(jié)構(gòu)的變化將影響到機體的生理狀態(tài)，因此利用組織工程學(xué)技術(shù)，即太空或者模擬微重力環(huán)境下來研究各種組織細胞的生長、分化及調(diào)控機制成為國內(nèi)外學(xué)者的研究方向，而雙向多樣本細胞實驗培養(yǎng)裝置是可以用于進行細胞模擬微重力效應(yīng)的研究。
　　模擬微重力狀態(tài)骨組織的影響對于牙體組織的研究具有一定的借鑒意義

2、，以往對牙周膜干細胞的研究多是體外模擬切應(yīng)變力的變化，而微重力狀態(tài)下對牙體組織的影響研究報道較少。
　　本課題采用模擬微重力效應(yīng)條件下，觀察微重力效應(yīng)對人牙周膜干細胞的增殖及凋亡影響，并進一步研究細胞骨架的形態(tài)學(xué)變化，分子水平的機制，以及細胞凋亡的分子機制。
　　研究目的：通過正常和模擬微重力條件下培養(yǎng)牙周膜干細胞，研究微重力狀態(tài)對牙周膜干細胞的增殖、分化和凋亡影響。
　　研究方法：采用有限稀釋法培養(yǎng)人牙周膜干細胞（p

3、eriodontalligamentstemcells，PDLSCs）并進行鑒定；將PDLSCs在模擬微重力條件下接種培養(yǎng)，RT-PCR、westernblot檢測細胞增值基因CyclinA、CDK2及干細胞表面標志STRO-1和CD146的表達情況；westernblot研究與凋亡相關(guān)的caspase-3表達，激光共聚焦顯微鏡觀察細胞骨架結(jié)構(gòu)；分析干細胞的標志基因STRO-1、CD146以及分化基因osteopontin、osteoc

4、alcin、Runx2的表達。
　　研究結(jié)果：通過有限稀釋法和免疫組化、干細胞表面分子標志、成脂、成骨向鑒定獲得人牙周膜干細胞PDLSCs；模擬微重力條件下CyclinA,CDK2基因表達可見明顯改變，細胞阻滯在G0/G1期，模擬微重力前后STRO-1和CD146均有表達；caspase-3基因出現(xiàn)表達；激光共聚焦顯示細胞骨架發(fā)生結(jié)構(gòu)改變；分化基因osteopontin、osteocalcin、Runx2的表達下調(diào)。
　　研