佛手散活血有效部位及其指紋圖譜研究.pdf

1、目的:通過對佛手散不同提取部位給藥血清指紋圖譜建立及其藥效學(xué)的研究,篩選佛手散活血有效部位。
　　方法:首先采用超臨界C02萃取(SFE)佛手散得SFE部位,其藥渣醇提后經(jīng)大孔吸附樹脂柱分離為幾個不同的醇洗脫部位(EE20部位、EE40部位、EE60部位和EE95部位)。GC/MS測定SFE部位指紋圖譜;HPLC測定不同醇洗脫部位的指紋圖譜。將不同提取部位分別給小鼠灌胃,腹腔注射異丙腎上腺素(Iso)致小鼠急性心肌缺血,測定動物給

2、藥前后心電圖的S—T段的偏移值,并取血測定紅細(xì)胞膜的流動性。將不同提取部位給新西蘭大白兔灌胃后,不同時間點采集血清,建立含藥血清HPLC指紋圖譜,結(jié)合抗心肌缺血的藥效學(xué)研究篩選出佛手散中活血的有效部位。
　　結(jié)果:通過不同提取部位給藥前后血清HPLC指紋圖譜的比較,發(fā)現(xiàn)EE20組、EE40組、EE60組和SFE組給藥血清與空白血清指紋圖譜有差異,比較給藥前后血清HPLC指紋圖譜的歐氏距離的變化,可以發(fā)現(xiàn)EE20組和EE40組吸收速

3、度最快。通過不同提取部位抗心肌缺血的藥效學(xué)研究發(fā)現(xiàn),與模型對照組相比,EE20組和EE40組的熒光偏振度P降低,有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01),對于S—T段偏移值的影響,在5min時EE20組和SFE組有顯著性差異(P＜0.01,P＜0.05);在10min時EE20組有非常顯著性差異(P＜0.01),EE40組和SFE組有顯著性差異(P＜0.05);在20min時EE20組和SFE組有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01

4、)。
　　結(jié)論:EE20組、EE40組和SFE組可拮抗Iso引起的AS—T段升高,可使小鼠升高的AS—T段明顯降低,能夠保護(hù)心肌細(xì)胞,起到抗急性心肌缺血的作用,增加細(xì)胞的抗缺血缺氧能力;通過紅細(xì)胞膜流動性實驗發(fā)現(xiàn),EE20組、EE40組也可代償性增強(qiáng)膜的流動性,改善急性缺血期的能量代謝障礙的狀態(tài),防止心肌的進(jìn)一步壞死。對不同提取部位給藥前后血清HPLC指紋圖譜研究,將有助于快速發(fā)現(xiàn)中藥的藥效部位,使中藥中活性成分的發(fā)現(xiàn)概率增加、周