二脂酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶及脂肪酰胺水解酶在結(jié)直腸癌中的表達及臨床意義.pdf

1、結(jié)直腸癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率居第四位，并且隨著我國飲食結(jié)構(gòu)和環(huán)境的改變，其發(fā)病率逐年上升。惡性增殖與侵襲能力是影響結(jié)直腸癌預(yù)后的最主要因素之一。所以研究增殖與侵襲的相關(guān)機制對于改善結(jié)直腸癌患者的預(yù)后具有重要的臨床意義。
　　 脂肪合成代謝的增加已證實是許多惡性腫瘤的共同現(xiàn)象，包括乳腺癌、前列腺癌和結(jié)直腸癌等[1]。脂滴作為脂代謝中重要的細胞器，其數(shù)量被發(fā)現(xiàn)在包括結(jié)直腸癌在內(nèi)的多種腫瘤細胞中明顯增多，并與腫瘤的侵襲能

2、力等多種生物學行為有關(guān)[2]。二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT1)是脂滴合成代謝中的關(guān)鍵酶，其在結(jié)直腸癌中的表達及生物學行為尚未見報道。
　　 惡性腫瘤細胞中脂肪代謝的改變包括多種酶活性的調(diào)整，花生四烯酰乙醇胺(Anandamide，AEA)和花生四烯酰甘油(2-Arachidonoylglycerol，2-AG)是抑制惡性腫瘤增殖的兩種脂質(zhì)，其滅活主要通過脂肪酰胺水解酶(Fatty acid amide hydrolase，F(xiàn)A

3、AH)[3]。FAAH在結(jié)直腸癌中的表達尚未見報道。
　　 本課題擬通過研究脂肪代謝中兩種影響腫瘤細胞惡性增殖與侵襲的酶在結(jié)直腸癌中的表達，分析其與臨床病理學參數(shù)的關(guān)系，為進一步研究惡性腫瘤的治療提供方向。
　　 目的：檢測DGAT1和FAAH在結(jié)直腸癌及正常腸粘膜中的表達，探討其臨床意義，并研究抑制DGAT1酶活性對結(jié)直腸癌細胞遷移侵襲能力的影響。
　　 方法：采用結(jié)直腸癌及對應(yīng)正常腸粘膜病理組織標本及結(jié)直腸癌

4、細胞株(HT-29、CaCo2、SW-480、SW-620、HCT-116和LoVo)為研究對象。
　　 分三部分進行：
　　 第一部分探討結(jié)腸癌細胞株及組織中DGAT1蛋白表達及與各項臨床病理參數(shù)的關(guān)系：采用熒光定量PCR和免疫印跡法檢測了HT-29、CaCo2、SW-480、SW-620、HCT-116和LoVo中DGAT1 mRNA和蛋白的表達；免疫組織化學染色檢測結(jié)直腸癌患者103例、相應(yīng)正常腸粘膜38例中DGA

5、T蛋白表達，分析其與臨床病理學參數(shù)的關(guān)系。
　　 第二部分對結(jié)直腸癌細胞株HT-29、HCT-116、SW-480施加DGAT1抑制劑，transwell實驗觀察其遷移侵襲能力的變化。
　　 第三部分探討結(jié)腸癌組織中FAAH蛋白表達及與各項臨床病理參數(shù)的關(guān)系：采用組織芯片技術(shù)結(jié)合免疫組織化學染色檢測結(jié)直腸癌患者169例、相應(yīng)正常腸粘膜38例中FAAH蛋白表達，分析其與臨床病理學參數(shù)的關(guān)系。
　　 結(jié)果
　　

6、 1.DGAT1在高侵襲性結(jié)腸癌細胞株HT29中高表達，在低侵襲性細胞株CaCo2、SW-480中低表達；DGAT1在103例結(jié)直腸癌組織中的陽性表達率顯著高于正常腸粘膜(77.7% vs.44.7%，P<0.01)，并與腫瘤的分化程度密切相關(guān)(P<0.01)。
　　 2.經(jīng)DGAT1特異性抑制劑處理后，HT-29、HCT-116、SW-480細胞的遷移能力和HT29的侵襲能力不同程度受到抑制，其中高表達DGAT1細胞株HT-

7、29抑制最顯著。
　　 3.FAAH在結(jié)直腸癌組織中的表達低于正常腸粘膜，169例結(jié)直腸癌組織中FAAH的陽性表達率顯著低于正常腸粘膜(56.8% vs.97.4%，P<0.001)，并與腫瘤的分化程度密切相關(guān)(P<0.01)。
　　 結(jié)論
　　 1、DGAT1在結(jié)直腸癌及正常腸粘膜中表達存在差異性，且高侵襲性細胞株HT29中高表達，提示DGAT1在結(jié)直腸的發(fā)生發(fā)展及侵襲中可能發(fā)揮重要作用。
　　 2、D