豬附紅細(xì)胞體體內(nèi)外培養(yǎng)特性及膠乳凝集診斷方法的研究.pdf

1、本試驗(yàn)采用不同抗凝劑、培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件探討了影響豬附紅細(xì)胞體體外培養(yǎng)的因素，成功地進(jìn)行了豬附紅細(xì)胞體體外培養(yǎng)，連續(xù)培養(yǎng)達(dá)96h以上。同時(shí)，將豬附紅細(xì)胞體感染SCID鼠體，進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，獲得較高水平的感染率，并表現(xiàn)部分臨床癥狀。分離體外培養(yǎng)的豬附紅細(xì)胞體作為抗原，以新型免疫微球載體——膠乳為載體，經(jīng)羧化處理制備膠乳診斷試劑，建立膠乳凝集試驗(yàn)檢測(cè)豬附紅細(xì)胞體的血清抗體。初步應(yīng)用本法檢測(cè)了52份樣品，并與鏡檢法進(jìn)行了比較。 研究結(jié)果表

2、明：豬附紅細(xì)胞體在肝素鈉抗凝、5％CO2、高糖RPMI-1640或HL為基礎(chǔ)培養(yǎng)液添加40％豬血清的完全培養(yǎng)基中均生長(zhǎng)良好，HL培養(yǎng)基的培養(yǎng)時(shí)間均較1640稍長(zhǎng)，紅細(xì)胞感染率與1640差異不顯著。豬附紅細(xì)胞體感染置換豬紅細(xì)胞的SCID鼠2天后即可在末梢血液中檢出該病原體，7～9d紅細(xì)胞感染率最高，高達(dá)70％，最長(zhǎng)可以持續(xù)28d。豬附紅細(xì)胞體的培養(yǎng)時(shí)間可延長(zhǎng)48h以上。制備的膠乳診斷抗原與牛邊緣無漿體、雙芽巴貝斯蟲、衣原體、豬瘟等陽性血清