青蒿內(nèi)生真菌抗植物病原菌的研究.pdf

1、植物內(nèi)生真菌是巨大的微生物資源，在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)與醫(yī)藥衛(wèi)生方面方面有重大意義，抗菌內(nèi)生真菌已成為人們研究的熱點(diǎn)，能夠產(chǎn)生許多新的活性物質(zhì)，不但可以用于醫(yī)藥新藥研發(fā)，還能用于農(nóng)業(yè)植物病害防治。中藥青蒿作為傳統(tǒng)中藥，廣泛用于治療多種疾病，其內(nèi)生真菌具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化等活性。
　　本研究以34株青蒿內(nèi)生真菌為實(shí)驗(yàn)材料，分別與獼猴桃褐腐病菌Botryosphaeria dothidea B12、獼猴桃炭疽病菌Collectotrichu

2、m sp. B6、獼猴桃褐腐病菌Monilinia laxa LHF、獼猴桃軟腐病菌phoma sp. HGHM、獼猴桃褐斑病菌Alternaria alternate RSF五種常見的獼猴桃病原真菌做平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株 WC-QHY-02-03具有較好的抑菌活性，抗菌譜最廣，對(duì)獼猴桃軟腐病菌HGHM的抑制效果最好，抑制率高達(dá)81.16％，對(duì)其他幾種獼猴桃病原真菌的抑制率也均在50%以上。
　　對(duì)菌株 WC-QHY-02-

3、03的生物學(xué)特性進(jìn)行研究，結(jié)果顯示該菌株生長(zhǎng)的適宜溫度為24-32℃，最適 pH為6.0，最佳碳源為葡萄糖，最佳氮源為酵母粉。結(jié)合形態(tài)學(xué)與分子系統(tǒng)發(fā)育的方法，確定該菌株為哈茨木霉 Trichoderma harzianum。
　　發(fā)酵條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)顯示，最佳的培養(yǎng)條件為：蔗糖30.0 g/L、NaNO312.0 g/L、MgSO41.5 g/L、K2HPO43.0 g/L。接種量為4%、培養(yǎng)基初始pH值7.0，120 r/min搖床

4、發(fā)酵12 d。優(yōu)化后發(fā)酵液對(duì)三種獼猴桃病原真菌均有抑制效果，發(fā)酵液濃度為100%時(shí)對(duì)獼猴桃褐腐病菌B12、獼猴桃炭疽病菌B6、獼猴桃褐斑病菌RSF三種病害菌的抑制率分別達(dá)到了80.26%、79.12%、45.84%。
　　該菌株發(fā)酵液乙酸乙酯粗提物對(duì)獼猴桃炭疽病菌B6、獼猴桃褐腐病菌B12、獼猴桃軟腐病菌HGHM和獼猴桃褐斑病菌RSF四種獼猴桃病害真菌均有較好的抑菌活性。對(duì)該粗提物進(jìn)行硅膠柱層析和薄層層析的方法進(jìn)行分離純化，得到較