山西29個產(chǎn)地野生黃芩RAPD分析與快速繁殖.pdf

1、黃芩為唇形科黃芩屬多年生草本植物，是我國大宗中藥材，藥用歷史悠久，用途廣泛。黃芩是山西省的道地藥材，生長分布于山西全境。
　　《中華人民共和國藥典》中收錄的黃芩為Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。根中含有黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素等主要藥用成分，具有清熱燥濕、瀉火解毒、抗病原體、抗腫瘤、抗過敏、鎮(zhèn)痛、保肝、增強(qiáng)免疫功能以及調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用。隨著中藥材認(rèn)可度的不斷提高，市場需求量越來

2、越大，過度采挖導(dǎo)致野生資源接近枯竭。黃芩商品藥材的供應(yīng)主要依靠人工種植，但在生產(chǎn)中又普遍存在種源混雜、種質(zhì)不清、種性退化、藥材質(zhì)量參差不齊等問題。
　　本項研究以山西省豐富的野生黃芩種質(zhì)資源為依托，應(yīng)用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)分析了山西29個產(chǎn)地的野生黃芩和7個產(chǎn)地的野生黃芩試管植株的遺傳多樣性與親緣關(guān)系；在有用成分含量測定的基礎(chǔ)上，應(yīng)用快速繁殖技術(shù)建立了15個產(chǎn)地的野生黃芩的快速繁殖體系并觀察、比較了試管植株的植物學(xué)性狀特征。

3、>　?、臥CR擴(kuò)增和聚類分析結(jié)果為：
　?、僭?9個產(chǎn)地的山西野生黃芩的PCR擴(kuò)增中，18條引物共擴(kuò)增出176條片段，產(chǎn)物片段大小多集中在300～2000 bp之間，其中含多態(tài)性條帶167條，平行性條帶9條，每條引物能擴(kuò)增4～18條多態(tài)性條帶，平均每條引物可擴(kuò)增9.28條多態(tài)性條帶，平均多態(tài)率為94.89﹪。29個產(chǎn)地的野生黃芩種質(zhì)可劃分為6個類群。
　?、谠?個產(chǎn)地的山西野生黃芩試管植株的PCR擴(kuò)增中，5條引物共擴(kuò)增出20

4、條片段，產(chǎn)物片段大小多集中在500～2000 bp之間，其中含多態(tài)性條帶17條，平行性條帶3條，每條引物能擴(kuò)增3～5條多態(tài)性條帶，平均每條引物可擴(kuò)增3.40條多態(tài)性條帶，平均多態(tài)率為85.00﹪。7個產(chǎn)地的野生黃芩種質(zhì)的試管植株可劃分為3個類群。
　　結(jié)果表明山西野生黃芩具有豐富的遺傳多樣性，其地理分布與遺傳多樣性沒有直接關(guān)系。
　?、七m合山西野黃芩快速繁殖的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件為：
　?、費S＋0.3 mg/L6-BA可

5、明顯促進(jìn)芽的增殖；芽增殖所需的光照強(qiáng)度以6600 lx、溫度以25℃（±1℃）為宜，光照培養(yǎng)/暗培養(yǎng)以14 h/10 h、溫差以3℃為宜，濕度宜保持在60﹪以上，不適宜的培養(yǎng)條件容易導(dǎo)致試管苗的玻璃化。
　　②White＋0.5 mg/LDSC＋1.5 mg/L IBA適合于根的誘導(dǎo)；在1/2MS＋0.5 mg/L DSC＋1.5 mg/L IBA培養(yǎng)基中試管苗的生長發(fā)育狀況優(yōu)于White培養(yǎng)基，其中不定根的伸長受到適當(dāng)抑制而避免

6、徒長，有利于試管植株的煉苗和移栽。
　?、叟囵B(yǎng)基中添加適宜濃度的AgNO3對試管植株芽的增殖具有促進(jìn)作用，其中以2.0 mg/L的濃度效果最佳。
　?、芘囵B(yǎng)基中添加20 g/L～40 g/L的蔗糖有利于試管苗芽的增殖和植株生長。
　?、菍?5個產(chǎn)地的山西野生黃芩試管植株的觀察、比較發(fā)現(xiàn)：來源不同的試管植株間的生長狀況差異很大，但同一產(chǎn)地的個體間差異很小。說明試管植株具有較好的遺傳穩(wěn)定性。
　　迄今為止尚未見到對山