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文檔簡介
1、黃芩Scutellaria baicalensis Georgi是我國傳統(tǒng)常用大宗中藥材。黃芩根中富含黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素等多種黃酮類化合物,用途廣泛,藥用價值高。
本研究以山西省的道地藥材黃芩為研究對象,在優(yōu)化主要成分提取條件及測定條件的基礎(chǔ)上,分析、測定了山西省35個不同產(chǎn)地的野生黃芩根中的黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素與總黃酮的含量;初步建立了山西野生黃芩細(xì)胞培養(yǎng)和不定根培養(yǎng)生產(chǎn)有用成分的技術(shù)體系,考察了多種理化
2、因子對懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、不定根培養(yǎng)的影響以及對黃芩苷和總黃酮合成的影響;觀察、比較了山西12個產(chǎn)地野生黃芩根、莖、葉的顯微結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果為山西省野生黃芩資源的保護(hù)、開發(fā)、利用和優(yōu)良野生黃芩種質(zhì)的選育提供了生藥學(xué)和解剖學(xué)指標(biāo),為應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)黃芩藥用成分提供了依據(jù)。
研究結(jié)果表明:
⑴山西野生黃芩根中總黃酮的適宜提取條件為:液固比80:1,60℃下65﹪乙醇超聲提取20 min;根中黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的適宜
3、分離條件為:流動相為甲醇(A)和0.4﹪磷酸水溶液(B);梯度洗脫程序為:0~50 min,38﹪A;50~55 min,38﹪~58﹪A;55~70min,58﹪A。
⑵35個產(chǎn)地的山西野生黃芩根中的黃芩苷含量為3.64﹪~15.31﹪,黃芩素含量為0.23﹪~2.28﹪,漢黃芩素含量為0.05﹪~0.62﹪,總黃酮含量為8.65﹪~27.06﹪。黃芩苷、總黃酮的含量總體上與緯度呈負(fù)相關(guān)。
?、巧轿饕吧S芩根的適宜消
4、毒條件為:75﹪乙醇預(yù)處理30 s,0.2﹪的HgCl2水溶液消毒10 min。根愈傷組織誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基為:MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT。根愈傷組織的生長曲線為“S”型,并且其生長與總黃酮的積累基本同步。暗培養(yǎng)有利于根愈傷組織的生長與總黃酮的合成。
?、壬轿饕吧S芩根細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)條件為:B5+0.2 mg/L2,4-D+0.8 mg/L6-B A+1.0 mg/L
5、 NAA+30 g/L蔗糖,初始接種量為10 g/L,培養(yǎng)基pH6.3。黃芩根懸浮細(xì)胞合成總黃酮的最適培養(yǎng)條件為:B5+0.4 mg/L2,4-D+0.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖,pH4.8。
?、缮轿饕吧S芩不定根生長及次生代謝產(chǎn)物合成的適宜培養(yǎng)條件為:1/2 MS+0.5mg/L DSC+50 g/L蔗糖,初始接種量為4 g/L,pH5.0。
?、?2個產(chǎn)地的山西野生黃芩的根在木
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