肺癌患者血清HBXAP DNA檢測(cè)及其臨床意義分析.pdf

1、目的:構(gòu)建pMD18-T-HBXAP質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品，建立SYBR Green實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法，檢測(cè)肺癌患者血清HBXAP DNA濃度，并分析其臨床意義。
　　 方法:
　　 1.提取血清DNA，構(gòu)建重組質(zhì)粒pMD18-T-HBXAP作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定量檢測(cè)。設(shè)計(jì)針對(duì)HBXAP DNA的引物，建立SYBR GreenFQ-PCR方法檢測(cè)血清HBXAP DNA濃度，并進(jìn)行線性范圍、精密度和特異性等方面的評(píng)價(jià)。

2、　　 2.收集65名肺癌患者靜脈血及相應(yīng)的臨床資料，20名健康體檢者靜脈血作對(duì)照。提取血清DNA，利用FQ-PCR方法定量檢測(cè)血清HBXAP DNA水平，分析發(fā)現(xiàn):肺癌患者血清HBXAP DNA濃度較健康對(duì)照組高，TNM分期Ⅲ-Ⅳ肺癌患者血清HBXAP DNA濃度顯著高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌患者，且伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者血清HBXAP DNA濃度顯著高于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者;HBXAP DNA聯(lián)合現(xiàn)有肺癌標(biāo)志物(SCC、CYFRA21

3、-1、NSE)可顯著提高對(duì)肺癌診斷的敏感性。
　　 結(jié)果:
　　 1.成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pMD18-T-HBXAP，并成功建立FQ-PCR方法，檢測(cè)肺癌患者和健康對(duì)照組血清HBXAP DNA濃度。
　　 2.血清HBXAP DNA與肺癌患者臨床特征及現(xiàn)有肺癌標(biāo)志物的關(guān)系分析:(1)肺癌患者血清HBXAP DNA濃度{2171.0(633.0，5366.7)copies/μl)顯著高于健康對(duì)照組血清HBXAP DNA

4、濃度{720.7(345.2，1240.6)copies/μl)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.001)。(2) TNM分期Ⅲ-Ⅳ期的肺癌患者血清HBXAP DNA濃度顯著高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌患者，伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者血清HBXAP DNA濃度顯著高于不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015，P=0.016)。(3)在ROC曲線中，AUC為0.767(95％ CI:0.664-0.870)。當(dāng)依據(jù)約登指數(shù)最大法選取1557

5、.6 copies/μl作為最佳截?cái)嘀禃r(shí)，HBXAP DNA診斷肺癌的敏感性和特異性分別為61.9％和93.7％。(4)在單獨(dú)診斷肺癌時(shí)，HBXAP DNA的敏感性最高，(61.9％)，且當(dāng)HBXAP DNA與現(xiàn)有的肺癌標(biāo)志物（如SCC、CYFRA21-1、NSE）聯(lián)合時(shí)可顯著提高肺癌診斷的敏感性。
　　 結(jié)論:成功建立了FQ-PCR定量檢測(cè)血清HBXAP DNA的方法。血清HBXAP DNA濃度在TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、伴有淋巴結(jié)