奧曲肽聯(lián)合奧沙利鉑對人結(jié)腸癌細胞SW480增殖及凋亡的實驗研究.pdf

1、目的：研究奧曲肽（Octreotide，OCT）與奧沙利鉑(Oxaliplatin，L-OHP)聯(lián)合應(yīng)用在體外對人結(jié)腸癌細胞株SW480增殖和凋亡的影響，并探討其可能的機制，為奧曲肽可能作為治療結(jié)腸癌的一種輔助抗癌藥物提供實驗依據(jù)和理論依據(jù)。
　　 方法：實驗分四組：空白對照組、奧曲肽單藥組、奧沙利鉑單藥組及奧曲肽+奧沙利鉑聯(lián)合用藥組。將不同濃度的奧曲肽、奧沙利鉑和一定濃度的奧曲肽聯(lián)合奧沙利鉑作用于體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細胞株SW4

2、80，1．采用MTT法檢測各組結(jié)腸癌細胞株SW480增殖情況；2．用DAPI檢測各組細胞的凋亡改變；3．使用流式細胞術(shù)(flow cytometry,FCM)分析藥物作用后各組細胞周期及凋亡率的改變；4．用逆轉(zhuǎn)錄景合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測各組細胞bax、fas、bcl-2基因的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1．奧曲肽、奧沙利鉑單藥組對人結(jié)腸癌細胞株SW480增殖均有明顯的抑制作用（P＜0.01），且隨著濃度的提高抑制

3、率也隨之提高。但奧曲肽在25μg/l濃度以上時，對細胞的抑制作用無明顯差異(P＞0.05)。奧曲肽聯(lián)合奧沙利鉑組對人結(jié)腸癌細胞株SW480的抑制作用明顯強于單獨用藥組（P＜0.01）；
　　 2．本實驗發(fā)現(xiàn)早期凋亡細胞的核染色質(zhì)呈核濃縮狀態(tài)，染色加深，或核染色質(zhì)呈新月形聚集于核膜一邊；晚期凋亡細胞的細胞核碎裂成大小不等的圓形小體，并被細胞膜所包繞，即凋亡小體；在聯(lián)合用藥組中，這種現(xiàn)象更加明顯；
　　 3．FCM結(jié)果表明：

4、奧沙利鉑組細胞周期中DNA合成期（S期）細胞比例增加（P＜0.01）；奧曲肽組細胞周期中DNA合成前期(G0/G1)細胞比例增加（P＜0.01）；聯(lián)合組細胞周期中DNA合成期（s期）細胞比例增加（P＜0.01），且與奧沙利鉑組相比差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)：
　　 4，F(xiàn)CM結(jié)果表明：對照組凋亡率為6.28±0.23％；奧沙利鉑（12.5μg/ml）組凋亡率為10.07±0.53％；奧曲肽（25.0μg/l）組凋亡率為1

5、0.63土0.14％；聯(lián)合組凋亡率為15.45±0.41％。與對照組的細胞凋亡率相比，奧沙利鉑組、奧曲肽組、聯(lián)合組均有所增加，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)：聯(lián)合組的細胞凋亡率大于奧沙利鉑組、奧曲肽組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；
　　 5.RT-PCR檢測結(jié)果顯示：與對照組、奧曲肽組、奧沙利鉑組相比，聯(lián)合組baxmRNA、fasmRNA表達顯著高于對照組和單獨用藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；聯(lián)合組bcl