肝門空腸吻合可行性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究肝門空腸直接吻合后吻合口的愈合牢固程度、組織學(xué)改變及術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生情況。
　　方法:隨機(jī)選擇清潔級(jí)比格犬12只,進(jìn)行肝門空腸直接吻合,按術(shù)后不同觀察時(shí)間分為1月組和3月組,每組6只。分別于術(shù)前,術(shù)后1天、3天、1周、2周、1月(和3月)進(jìn)行靜脈采血,進(jìn)行肝功能檢測(cè)。按不同分組于術(shù)后1月、3月處死動(dòng)物,觀察腹腔內(nèi)有無(wú)出血、感染、吻合口漏、腸道內(nèi)膽汁等情況及膽管有無(wú)狹窄及閉塞。取肝腸吻合口及腸腸吻合口,并測(cè)定其爆破壓:于吻合

2、口遠(yuǎn)端5cm處結(jié)扎,近端接帶有測(cè)壓計(jì)的注射泵,以2ml/min速率注入生理鹽水,以最高壓力點(diǎn)突然降低為破裂壓。取吻合口、吻合口內(nèi)膽管及肝臟作組織學(xué)檢查,HE染色觀察吻合口炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度、肉芽組織生長(zhǎng)、膠原纖維排列及新生毛細(xì)血管情況;觀察吻合口處膽管及肝臟的病變情況?？辔端?天狼星紅染色觀察吻合口組織Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維的分布與特征,并用ImagePro-plus5.1圖像處理軟件進(jìn)行圖像分析,計(jì)算每張照片中Ⅰ、Ⅲ型膠原所占相對(duì)面積,得出①

3、Ⅰ、Ⅲ型膠原含量;②總膠原含量;③Ⅰ型膠原占總膠原的比例。
　　結(jié)果:術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活至預(yù)定取材日期,食欲、活動(dòng)正常,鞏膜無(wú)黃染。術(shù)前,術(shù)后1日、3日、1周、2周、1月(和3月),分別進(jìn)行靜脈采血,進(jìn)行肝功能檢測(cè),除1例術(shù)后出現(xiàn)肝功能損傷外(術(shù)后2周谷丙轉(zhuǎn)氨酶為386IU/L,谷草轉(zhuǎn)氨酶為133IU/L,達(dá)到最高峰,之后逐漸好轉(zhuǎn)直至正常,膽紅素全程無(wú)明顯異常。術(shù)后病理證實(shí)肝臟淤血),其余術(shù)后均未出現(xiàn)肝功能損傷。術(shù)后1、3個(gè)月按組

4、分別處死動(dòng)物,觀察標(biāo)本未發(fā)現(xiàn)出血、膽漏、逆行性感染等并發(fā)癥,吻合口內(nèi)曠置的膽管無(wú)狹窄及閉塞,肝門空腸吻合的空腸袢內(nèi)膽汁存在。術(shù)后1個(gè)月肝腸吻合口平均爆破壓為33.65±7.15kPa,腸腸爆破壓為40.31±5.47kPa;術(shù)后3個(gè)月肝腸吻合口平均爆破壓為32.67±5.93kPa,腸腸爆破壓為38.55±7.76kPa;數(shù)據(jù)采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),肝腸吻合口在術(shù)后1個(gè)月、3個(gè)月與腸腸吻合口的爆破壓均無(wú)明顯差異(P>0.05)。取肝腸吻

5、合口的組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)肝腸兩種組織愈合良好,肝腸直接吻合對(duì)肝臟組織學(xué)改變無(wú)明顯影響。HE染色:肝腸吻合組織中腸壁平滑肌、膠原結(jié)締組織和肝小葉直接粘合,粘合處伴有局部出血和炎細(xì)胞浸潤(rùn),其中可見(jiàn)局部區(qū)域淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞和少數(shù)粒細(xì)胞,同時(shí)可見(jiàn)膠原纖維伴有毛細(xì)血管增生,形成肉芽組織。膽管:膽管壁較薄,粘膜可見(jiàn)排列整齊的單層柱狀上皮。膽管壁毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張淤血,管壁外少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),管腔無(wú)狹窄,近端肝內(nèi)膽管未見(jiàn)明顯擴(kuò)張?？辔端?天狼

6、星紅染色所測(cè)膠原中1月組肝腸吻合口和腸腸吻合口總膠原含量分別為1.47E4±7.90E3、1.62E4±1.20E4(P>0.05),Ⅰ型膠原占總膠原百分比分別為9.33E1±5.23E0％、9.21E1±6.47E0%(P>0.05)。3月組中肝腸吻合口和腸腸吻合口總膠原含量分別為1.39E4±9.29E3、1.65E4±1.14E4(P>0.05),Ⅰ型膠原占總膠原百分比分別為9.30E1±5.83E0%、9.15E1±6.91E0