復(fù)合移植用膠原真皮支架的制備研究及其性能表征.pdf

1、大面積燒傷、創(chuàng)傷和皮膚潰瘍等皮膚缺損會(huì)導(dǎo)致皮膚功能障礙，嚴(yán)重時(shí)會(huì)危及患者生命。治療皮膚缺損不僅需要及時(shí)和永久的覆蓋創(chuàng)面而且要能最大限度地恢復(fù)其功能和外觀，傳統(tǒng)的治療方法不能同時(shí)滿足上述兩個(gè)要求。近年來(lái)皮膚組織工程學(xué)的出現(xiàn)為改善創(chuàng)面修復(fù)質(zhì)量，解決皮源不足等問(wèn)題提供了嶄新的思路和方法。運(yùn)用皮膚組織工程學(xué)構(gòu)建的復(fù)合皮是一種新型的永久性創(chuàng)面覆蓋物，具有組織彈性好、耐磨、拉伸力和外觀質(zhì)地近似正常皮膚等優(yōu)點(diǎn)，是目前研究的熱點(diǎn)，其中真皮支架不僅影響表

2、皮細(xì)胞的生物學(xué)行為和培養(yǎng)效率，而且決定著移植效果，是制約復(fù)合移植的一個(gè)瓶頸。在現(xiàn)有的真皮支架中，脫細(xì)胞真皮基質(zhì)因其更接近正常真皮結(jié)構(gòu)，成為近年來(lái)研究熱點(diǎn)之一。但由于制備思路的局限與制備工藝的不足，目前脫細(xì)胞真皮基質(zhì)存在著免疫原性較強(qiáng)、降解速度慢、生物活性低和滲透性差等缺點(diǎn)。 針對(duì)以上不足，本論文以組織工程學(xué)原理為指導(dǎo)，綜合運(yùn)用化學(xué)化工、皮革科學(xué)與工程、生物醫(yī)學(xué)工程以及材料學(xué)等知識(shí)，采用多種化學(xué)、生物與物理綜合方法處理乳豬皮，在前

3、期研究基礎(chǔ)上，重點(diǎn)研究交聯(lián)、復(fù)合對(duì)新型膠原支架性能的影響，優(yōu)選了關(guān)鍵制備技術(shù)和方法，確定了復(fù)合移植用膠原真皮支架的制備工藝，并對(duì)其主要性能進(jìn)行了表征。其主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： (1)優(yōu)化戊二醛和碳化二亞胺(EDC)的交聯(lián)條件，并研究其對(duì)材料收縮溫度、拉伸強(qiáng)度和降解性等性能的影響，尋求適當(dāng)?shù)慕宦?lián)劑及交聯(lián)方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：隨著交聯(lián)劑用量的增加，收縮溫度不斷提高；經(jīng)EDC交聯(lián)試樣的拉伸強(qiáng)度沒(méi)有明顯變化，而經(jīng)戊二醛交聯(lián)的有小幅度提高

4、；用EDC交聯(lián)試樣的體外降解時(shí)間增加幅度略高于經(jīng)戊二醛交聯(lián)的；經(jīng)兩種交聯(lián)劑交聯(lián)試樣的溶脹度都有大幅度的下降；成纖維細(xì)胞在EDC交聯(lián)試樣上的增殖情況明顯好于戊二醛交聯(lián)的。 (2)優(yōu)化硫酸軟骨素等的復(fù)合工藝，并研究其對(duì)支架材料性能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：復(fù)合的硫酸軟骨素等多糖可以在支架中保持較長(zhǎng)時(shí)間，保證其可以在支架中較好的發(fā)揮作用；硫酸軟骨素等多糖的復(fù)合可以增加材料的拉伸強(qiáng)度以及延長(zhǎng)體外降解時(shí)間等，但效果不明顯；在材料中復(fù)合殼寡糖、

5、硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸均能有效增強(qiáng)支架材料的細(xì)胞黏附性；肝素在增強(qiáng)材料細(xì)胞黏附性方面效果不明顯。 (3)以組織工程原理為指導(dǎo)，依據(jù)(1)、(2)的研究結(jié)果，結(jié)合現(xiàn)有材料的優(yōu)點(diǎn)以及理想真皮支架材料的要求，構(gòu)建了一種復(fù)合移植用膠原真皮支架，并檢測(cè)了其主要性能。結(jié)果顯示：復(fù)合移植用膠原真皮支架表面較光滑，纖維編織緊密；其拉伸強(qiáng)度介于10.01-10.87 MPa之間，具有較好的拉伸強(qiáng)度；體外降解時(shí)間處于20.50 h之間，并可根據(jù)需要

6、采取不同的處理工藝進(jìn)行調(diào)整；孔隙率處于87-93﹪之間：透水汽性在3000 g.m<'-2>224h<'-1>左右；復(fù)合移植用膠原真皮支架中的纖維間質(zhì)去除干凈：掃描電鏡微觀結(jié)構(gòu)觀察顯示膠原纖維束保持了其原有結(jié)構(gòu)并得到松散，材料內(nèi)部具有豐富的多孔結(jié)構(gòu)；具有良好的生物活性，能有效促進(jìn)細(xì)胞的黏附、增殖和生長(zhǎng)。 本文制備的復(fù)合移植用膠原真皮支架充分去除了毛、表皮及纖維間質(zhì)，弱化膠原的抗原性，并用EDC適度交聯(lián)以及復(fù)合硫酸軟骨素、殼寡糖和