癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞和胸腺嘧啶合成酶表達(dá)與結(jié)直腸癌耐藥的研究.pdf

1、背景:結(jié)直腸癌是危害人類健康的常見惡性腫瘤之一。在西方發(fā)達(dá)國家，結(jié)直腸癌已占惡性腫瘤死亡人數(shù)的第2位。我國有關(guān)資料顯示，大腸癌發(fā)病率占全部惡性腫瘤的第4位，并有逐漸增加的趨勢。但目前對結(jié)直腸癌有效的評估、治療和預(yù)后等方面的研究仍沒有實質(zhì)性進(jìn)展。
　　越來越多的研究證實，腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，與腫瘤細(xì)胞所處的微環(huán)境密切相關(guān)。腫瘤微環(huán)境主要由間質(zhì)細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrixc，ECM)構(gòu)成。間質(zhì)細(xì)胞包括成纖維

2、細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞以及各種炎細(xì)胞等。腫瘤微環(huán)境中的間質(zhì)成分不同于正常組織學(xué)中的間質(zhì)成分。腫瘤微環(huán)境中的間質(zhì)成分為反應(yīng)性間質(zhì)成分，通過與腫瘤細(xì)胞的相互作用在腫瘤的形成與演進(jìn)過程中扮演了重要角色。
　　腫瘤微環(huán)境中的成纖維細(xì)胞被稱為癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞，是腫瘤微環(huán)境中間質(zhì)細(xì)胞的主要類型，是活化的成纖維細(xì)胞，兼有成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的特點和功能。免疫組織化學(xué)染色顯示其表達(dá)平滑肌肌動蛋白SMA、中間絲蛋白vimeniin和結(jié)蛋

3、白desmin。SMA是公認(rèn)的癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞的通用標(biāo)記物。研究表明部分腫瘤周邊的癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞可能通過旁分泌作用（間質(zhì)一上皮相互作用），引起腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)化、基質(zhì)成分的改變、血管生成等而促進(jìn)或抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。
　　目前結(jié)直腸癌的治療仍以手術(shù)和化療為主。5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)作為結(jié)直腸癌的一線化療藥，其化療療效常受到耐藥性的限制。胸腺嘧啶合成酶(thymidylate synthase，T

4、S)是5-FU發(fā)揮細(xì)胞毒作用的主要靶酶。TS功能的變異可影響5-FU的毒性與療效，TS表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞對5-FU的敏感性密切相關(guān)。
　　目前對于結(jié)直腸癌間質(zhì)癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞的觀察剛剛起步，有關(guān)結(jié)直腸癌間質(zhì)內(nèi)SMA陽性癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞及TS表達(dá)與腫瘤化療效果關(guān)系的研究尚未見報道。
　　目的:探討SMA陽性癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞及TS表達(dá)與結(jié)直腸癌術(shù)后化療效果的關(guān)系。
　　方法:采用免疫組織化學(xué)ElivisionTM p

5、lus兩步法的方法，研究10例正常結(jié)腸粘膜、30例結(jié)直腸癌中SMA和TS的表達(dá)情況，分析其與臨床病理特征的關(guān)系及四者之間相互作用關(guān)系。統(tǒng)計分析采用SPSS13.0軟件，數(shù)據(jù)采用x2檢驗、Fisher確切概率法及相關(guān)分析。
　　結(jié)果:
　　1.SMA免疫組化染色
　　SMA陽性物質(zhì)在對照組主要分布于粘膜層的中下部，呈線狀圍繞在固有層腺體周圍，底部與粘膜肌層形成連接。
　　結(jié)直腸癌標(biāo)本中，除間質(zhì)血管壁平滑肌組織外，S

6、MA廣泛表達(dá)于腫瘤間質(zhì)內(nèi)，其染色強(qiáng)度不等，多數(shù)強(qiáng)染色。
　　13例男性患者中CAF低比例組有8例，高比例組有5例;17例女性患者中，CAF低比例組有10例，高比例組有7例;統(tǒng)計分析顯示無顯著差異(P=1.000)。(Table1)11例年齡＜60歲患者中，CAF低比例組有6例，高比例組有5例;19例≥60歲患者中，CAF低比例組有12例，高比例組有7例;結(jié)果顯示無顯著差異(P=0.712)。(Table1)30例結(jié)直腸癌患者，Ⅰ期

7、CAF低比例組有2例，高比例組有1例;Ⅱ期CAF低比例組有10例，高比例組有5例;Ⅲ期CAF低比例組有6例，高比例組有5例;Ⅳ期無CAP低比例病例，高比例有1例;統(tǒng)計分析顯示不同臨床分期的CAF比例無顯著差異（P=0.579）。(Table1)17例高中分化患者中CAF低比例組有10例，高比例組有7例;13例低分化組CAF低比例組有8例，高比例組有5例;統(tǒng)計分析顯示不同組織學(xué)分級的CAF比例無顯著差異（P=0.856）。(Table1)

8、19例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中CAF低比例組有12例，高比例組有7例;11例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CAF低比例組有6例，高比例組有5例;統(tǒng)計分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與CAF比例無顯著差異（P=0.712）。(Table1)12月內(nèi)死亡的病例CAF低比例組有5例，高比例組有2例;生存期在12～24月的病例CAF低比例組有1例，高比例組有3例;生存期在25～36月的病例CAF低比例組有2例，高比例組有3例;生存期在37～48月的病例CAF低比例組有1例，高比例組

9、有2例;生存時間大于48個月的病例CAF低比例組有9例，高比例組有2例;統(tǒng)計分析顯示不同生存期與CAF比例無顯著差異(P=0.386)。(Table2)進(jìn)一步統(tǒng)計30例結(jié)直腸癌患者生存時間與化療及CAF間關(guān)系表明，結(jié)果表明均無顯著性差異（P=0.498，P=0.277）。(Table3)
　　2.TS染色:
　　TS在正常對照組腸粘膜無陽性表達(dá)。在30例結(jié)直腸癌組織中有14例表達(dá)陽性，16例陰性表達(dá)。
　　13例男性患

10、者中TS陽性表達(dá)6例，陰性7例;17例女性患者中，TS陽性表達(dá)8例，陰性9例;統(tǒng)計分析TS表達(dá)在性別間無顯著差異(P=1.000)。(Table1)11例年齡＜60歲患者中，TS陽性表達(dá)7例，陰性4例;19例＞60歲患者中，TS陽性7例，陰性12例;統(tǒng)計分析顯示不同年齡患者間TS表達(dá)無顯著差異（P=0.257）。(Table1)30例結(jié)直腸癌患者，Ⅰ期TS陽性1例，陰性2例;Ⅱ期TS陽性8例，陰性7例;Ⅲ期TS陽性5例，陰性6例;Ⅳ期無

11、TS陽性病例，陰性表達(dá)1例;統(tǒng)計分析顯示不同臨床分期的TS表達(dá)無顯著差異（P=0.714）
　　17例高中分化患者TS陽性7例，陰性10例;13例低分化組TS陽性7例，陰性6例;統(tǒng)計分析顯示不同組織學(xué)分級的TS表達(dá)無顯著差異（P=0.713）(Table1)19例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者TS陽性9例，陰性10例;11例低分化組TS陽性5例，陰性6例;統(tǒng)計分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與TS表達(dá)無顯著差異(P=1.000)(Table1)12月內(nèi)死亡的

12、病例中TS陽性3例，陰性4例;生存期在12～24月的病例TS陽性1例，陰性3例;生存期在25～36月的病例中TS陽性2例，陰性3例;生存期在37～48月的病例TS陽性1例，陰性2例;生存時間大于48個月的病例TS陽性7例，陰性4例;統(tǒng)計分析顯示不同生存期與TS表達(dá)無顯著差異（P=0.289）。(Table2)進(jìn)一步統(tǒng)計30例結(jié)直腸癌患者生存時間與化療及TS表達(dá)關(guān)系表明，結(jié)果顯示無顯著性差異（P=0.857，P=0.550）。(Table

13、4)
　　3.CAF比例和TS表達(dá)相關(guān)性分析統(tǒng)計分析進(jìn)一步顯示，結(jié)直腸癌組織中CAF比例和TS的表達(dá)之間沒有相關(guān)性(r=0.055，P＞0.05)(Table5)。
　　結(jié)論:
　　1.結(jié)直腸癌患者的性別、年齡、臨床分期、組織學(xué)類型、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、化療后生存時間等均與間質(zhì)內(nèi)癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞比例無關(guān)。
　　2.結(jié)直腸癌患者的性別、年齡、臨床分期、組織學(xué)類型、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移化療后生存時間等與癌組織TS陽性表達(dá)無關(guān)