S100P對結(jié)直腸癌細胞系的影響及其在結(jié)直腸癌組織中的表達和意義.pdf

1、目的：
　　 觀察S100P對人結(jié)直腸癌細胞系SW480生物學行為（生長增殖、遷移、侵襲及對5-FU的敏感性）的影響。檢測S100P在結(jié)直腸癌組織中的表達情況，探討其臨床病理意義。
　　 方法：
　　 采用Real-time PCR方法檢測S100P mRNA在正常人結(jié)腸細胞系NCM460及結(jié)直腸癌細胞系SW480，SW620，HCT116，LS180，HT29及DLD-1中的表達情況。構(gòu)建S100P慢病毒轉(zhuǎn)染載

2、體，轉(zhuǎn)染至不表達S100P的人結(jié)直腸癌SW480細胞，用RT-PCR及Western Blotting方法檢測其是否轉(zhuǎn)染成功。用MTT法檢測細胞的生長增殖情況，分析S100P對SW480細胞的生長增殖及其對5-FU敏感性的影響;采用Transwell細胞遷移和侵襲實驗，分析S100P對細胞遷移和侵襲能力的影響。
　　 收集86例我院2003-2007年結(jié)直腸癌石蠟包埋組織及其癌旁的正常腸粘膜組織，制作成組織芯片，免疫組織化學法檢

3、測S100P在其中的表達情況。分析S100P在結(jié)直腸癌組織和正常腸粘膜組織之間的差異;研究S100P的表達與患者各項臨床病理指標（性別、TNM分期、分化程度、腫塊大小、腫塊浸潤深度、腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及腫瘤有無復發(fā)）之間的關系;分析S100P的表達與患者預后之間的關系。
　　 結(jié)果：
　　 (1)正常人結(jié)腸細胞系NCM460及結(jié)直腸癌SW620，LS180，HT29及DLD-1細胞系中均檢測到S100P mRNA的表達;

4、而在結(jié)直腸癌SW480和HCT116細胞系中未出現(xiàn)S100P mRNA的表達。
　　 (2)經(jīng)S100P慢病毒載體轉(zhuǎn)染成功后的SW480細胞，S100P mRNA和蛋白表達水平明顯增加。
　　 (3)野生型SW480細胞、未整合S100P基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染的SW480-EGFP細胞和穩(wěn)定表達S100P的SW480-S100P細胞的生長增殖情況沒有表現(xiàn)出明顯的差別。
　　 (4)與SW480和SW480-EGFP

5、細胞相比，SW480 S100P細胞對5-FU的敏感性下降。
　　 (5)與SW480和SW480-EGFP細胞相比，SW480-S100P細胞的遷移和侵襲能力明顯增強，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　 (6)86例結(jié)直腸癌組織中，S100P高表達有65例，高表達率75.58％(65/86);而在其對應的86例癌旁正常腸粘膜組織中，S100P高表達15例，高表達率僅為17.44％(15/86)。S100P在結(jié)直腸

6、癌組織中的高表達率明顯高于癌旁正常腸粘膜組織，高出58.14％，兩組之間進行比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　 (7) S100P表達水平在不同TNM分期中出現(xiàn)差異，Ⅰ-Ⅱ期中，S100P高表達率66.67％(32/48)，Ⅲ期為86.84％(33/38)。在未出現(xiàn)腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和有腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，S100P高表達率分別為66.67％(30/45)、85.37％(35/41)。統(tǒng)計學分析結(jié)果顯示，S100P的

7、表達與腫瘤TNM分期和腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(P值分別為0.031和0.044);而與患者性別、分化程度、腫塊大小、腫塊浸潤深度及腫瘤有無復發(fā)之間的差異未出現(xiàn)統(tǒng)計學意義。
　　 (8) Kaplan-Meier單因素生存分析結(jié)果顯示，S100P表達與病人預后之間未出現(xiàn)統(tǒng)計學意義（P=0.171），但生存曲線顯示S100P低表達者相對高表達者生存時間較長。
　　 結(jié)論：
　　 (1) S100P不影響SW480細胞

8、的生長增殖。
　　 (2) S100P的高表達降低了結(jié)直腸癌細胞SW480對5-FU的敏感性。
　　 (3) S100P能增加SW480細胞遷移和侵襲的能力。
　　 (4) S100P在結(jié)直腸癌組織中表達升高，而在正常腸粘膜組織中表達較低，可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生。
　　 (5) S100P的表達與腫瘤TNM分期和腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈正相關，說明其可能促進結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移。
　　 (6) S100P