S100P對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞系的影響及其在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：
　　 觀察S100P對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞系SW480生物學(xué)行為（生長(zhǎng)增殖、遷移、侵襲及對(duì)5-FU的敏感性）的影響。檢測(cè)S100P在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況，探討其臨床病理意義。
　　 方法：
　　 采用Real-time PCR方法檢測(cè)S100P mRNA在正常人結(jié)腸細(xì)胞系NCM460及結(jié)直腸癌細(xì)胞系SW480，SW620，HCT116，LS180，HT29及DLD-1中的表達(dá)情況。構(gòu)建S100P慢病毒轉(zhuǎn)染載

2、體，轉(zhuǎn)染至不表達(dá)S100P的人結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞，用RT-PCR及Western Blotting方法檢測(cè)其是否轉(zhuǎn)染成功。用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖情況，分析S100P對(duì)SW480細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖及其對(duì)5-FU敏感性的影響;采用Transwell細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)，分析S100P對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。
　　 收集86例我院2003-2007年結(jié)直腸癌石蠟包埋組織及其癌旁的正常腸粘膜組織，制作成組織芯片，免疫組織化學(xué)法檢

3、測(cè)S100P在其中的表達(dá)情況。分析S100P在結(jié)直腸癌組織和正常腸粘膜組織之間的差異;研究S100P的表達(dá)與患者各項(xiàng)臨床病理指標(biāo)（性別、TNM分期、分化程度、腫塊大小、腫塊浸潤(rùn)深度、腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及腫瘤有無(wú)復(fù)發(fā)）之間的關(guān)系;分析S100P的表達(dá)與患者預(yù)后之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 (1)正常人結(jié)腸細(xì)胞系NCM460及結(jié)直腸癌SW620，LS180，HT29及DLD-1細(xì)胞系中均檢測(cè)到S100P mRNA的表達(dá);

4、而在結(jié)直腸癌SW480和HCT116細(xì)胞系中未出現(xiàn)S100P mRNA的表達(dá)。
　　 (2)經(jīng)S100P慢病毒載體轉(zhuǎn)染成功后的SW480細(xì)胞，S100P mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯增加。
　　 (3)野生型SW480細(xì)胞、未整合S100P基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染的SW480-EGFP細(xì)胞和穩(wěn)定表達(dá)S100P的SW480-S100P細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖情況沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的差別。
　　 (4)與SW480和SW480-EGFP

5、細(xì)胞相比，SW480 S100P細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性下降。
　　 (5)與SW480和SW480-EGFP細(xì)胞相比，SW480-S100P細(xì)胞的遷移和侵襲能力明顯增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 (6)86例結(jié)直腸癌組織中，S100P高表達(dá)有65例，高表達(dá)率75.58％(65/86);而在其對(duì)應(yīng)的86例癌旁正常腸粘膜組織中，S100P高表達(dá)15例，高表達(dá)率僅為17.44％(15/86)。S100P在結(jié)直腸

6、癌組織中的高表達(dá)率明顯高于癌旁正常腸粘膜組織，高出58.14％，兩組之間進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 (7) S100P表達(dá)水平在不同TNM分期中出現(xiàn)差異，Ⅰ-Ⅱ期中，S100P高表達(dá)率66.67％(32/48)，Ⅲ期為86.84％(33/38)。在未出現(xiàn)腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和有腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，S100P高表達(dá)率分別為66.67％(30/45)、85.37％(35/41)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，S100P的

7、表達(dá)與腫瘤TNM分期和腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)(P值分別為0.031和0.044);而與患者性別、分化程度、腫塊大小、腫塊浸潤(rùn)深度及腫瘤有無(wú)復(fù)發(fā)之間的差異未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (8) Kaplan-Meier單因素生存分析結(jié)果顯示，S100P表達(dá)與病人預(yù)后之間未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.171），但生存曲線顯示S100P低表達(dá)者相對(duì)高表達(dá)者生存時(shí)間較長(zhǎng)。
　　 結(jié)論：
　　 (1) S100P不影響SW480細(xì)胞

8、的生長(zhǎng)增殖。
　　 (2) S100P的高表達(dá)降低了結(jié)直腸癌細(xì)胞SW480對(duì)5-FU的敏感性。
　　 (3) S100P能增加SW480細(xì)胞遷移和侵襲的能力。
　　 (4) S100P在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)升高，而在正常腸粘膜組織中表達(dá)較低，可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生。
　　 (5) S100P的表達(dá)與腫瘤TNM分期和腸周淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)，說(shuō)明其可能促進(jìn)結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移。
　　 (6) S100P