紅錐組織培養(yǎng)中褐化抑制方法研究.pdf

1、紅錐（Castanopsis hystrixMiq.）隸屬殼斗科（Fagaceae）栲屬（Castanopsis），常綠喬木，是南方地區(qū)重要的鄉(xiāng)土珍貴闊葉用材和高效多用途速生樹種。組織培養(yǎng)技術(shù)是紅錐優(yōu)樹快速繁殖及無性化推廣的重要技術(shù)途徑，但褐化嚴(yán)重影響其高效組培再生體系的建立。本文通過對(duì)外植體滅菌方法、取材時(shí)間、幼嫩程度、基因型、光照及溫度等技術(shù)要素、防褐化劑種類應(yīng)用等進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，探索了外植體誘導(dǎo)防褐化的方法；通過植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類及

2、其濃度、防褐化劑及其濃度等進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，探索了增殖培養(yǎng)中防褐化的方法。主要研究結(jié)論如下：
　　1、初步建立了紅錐優(yōu)樹外植體采集、處理及誘導(dǎo)過程防褐化技術(shù)措施。
　?。?）采用酒精進(jìn)行外植體表面消毒，會(huì)加劇外植體褐化程度。
　?。?）外植體采集時(shí)間對(duì)褐化率無顯著影響，但對(duì)誘導(dǎo)率、污染率有極顯著影響。10月份取材效果較好，誘導(dǎo)率為48.9％。
　?。?）外植體幼嫩程度對(duì)誘導(dǎo)率、褐化率有極顯著影響。隨著枝條的木質(zhì)化程度

3、增加，褐化率加大。試驗(yàn)表明選取半木質(zhì)化枝條中部3~5節(jié)效果最佳。
　?。?）基因型對(duì)誘導(dǎo)率、褐化率有極顯著影響。試驗(yàn)用的6個(gè)母株，以HZ3誘導(dǎo)效果最佳，褐化程度輕，腋芽萌動(dòng)快，長(zhǎng)勢(shì)好，誘導(dǎo)率達(dá)62.2%，褐化率為48.9%。
　?。?）黑暗及低溫預(yù)處理對(duì)褐化率無顯著影響。
　?。?）防褐化劑VC、PVP的效果好。添加VC（80 mg.L-1）的腋芽萌動(dòng)快，芽飽滿且壯，長(zhǎng)勢(shì)好，誘導(dǎo)率、褐化率分別為47.8%、33.3%；

4、添加PVP（1.0 g.L-1）的褐化率和誘導(dǎo)率分別為12.2%、56.7%，腋芽長(zhǎng)勢(shì)好。
　　紅錐優(yōu)樹組培無菌系建立技術(shù)程序?yàn)椋河?0月份剪取幼嫩合適的外植體，較佳的誘導(dǎo)培養(yǎng)基：改良MS+6-BA1.0mg.L-1+ NAA0.05mg.L-1+ PVP1.0g.L-1（或VC80 mg.L-1）。
　　2、初步建立紅錐增殖培養(yǎng)中防褐化措施。
　?。?）細(xì)胞分裂素及其濃度對(duì)增殖系數(shù)、褐化率均有極顯著影響，6-BA增殖

5、及防褐化效果均較ZT、KT好，濃度為1.0 mg.L-1時(shí)，效果最佳，增殖系數(shù)達(dá)2.14，褐化率為54.5%。
　?。?）細(xì)胞生長(zhǎng)素及其濃度對(duì)褐化率無顯著影響，對(duì)增殖系數(shù)有極顯著影響，其中NAA效果較IBA好，濃度0.05 mg.L-1時(shí)，效果最佳，增殖系數(shù)達(dá)2.22。
　　（3）不同濃度的防褐化劑對(duì)褐化率、增殖系數(shù)有極顯著影響。低濃度Na2S2O3（0.1g.L-1、0.5 g.L-1）、AC、PVP、VC均可降低褐化程度

6、。不同防褐化劑對(duì)增殖效果影響差異顯著，Na2S2O3、AC的增殖系數(shù)低，長(zhǎng)勢(shì)差，對(duì)芽生長(zhǎng)造成不良現(xiàn)象；PVP（0.5 g.L-1、1.0 g.L-1）增殖系數(shù)分別為1.88、1.92，效果一般，長(zhǎng)勢(shì)良好；VC的增殖效果最好，整體芽長(zhǎng)勢(shì)好，其中VC（80 mg.L-1）最佳，增殖系數(shù)為2.27、褐化率為31.1%，芽長(zhǎng)勢(shì)好，壯且翠綠。
　　紅錐優(yōu)樹組培較佳的增殖培養(yǎng)基：改良MS+6-BA1.0 mg.L-1+NAA0.05 mg.L