氮、磷、鉀元素對(duì)油松胚培養(yǎng)影響的研究.pdf

1、油松(Pinustabulaeformis)在我國(guó)松屬樹(shù)種中占有十分重要的地位，它分布廣泛，具有保持水土、美化環(huán)境的重要作用及較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。在我國(guó)，油松主要通過(guò)建立種子園的途徑進(jìn)行良種繁育，但種子園投資大，結(jié)實(shí)晚，面積有限，種子數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足生產(chǎn)需要，而通過(guò)組織培養(yǎng)擴(kuò)大良種繁殖系數(shù)，是解決良種快繁的主要途徑之一。盡管有關(guān)油松的組織培養(yǎng)，國(guó)內(nèi)外已有一定的研究，但所有這些研究中未見(jiàn)培養(yǎng)基中主要營(yíng)養(yǎng)元素(氮、磷、鉀)的形態(tài)配比及濃度對(duì)油松

2、胚培養(yǎng)影響的報(bào)道。本文對(duì)培養(yǎng)基中氮、磷、鉀元素的形態(tài)配比及濃度對(duì)油松離體胚培養(yǎng)不定芽誘導(dǎo)、增殖、生長(zhǎng)及不定根形成的影響進(jìn)行了較為深入、系統(tǒng)地研究，研究結(jié)果如下： 1.培養(yǎng)基中氮、磷、鉀元素對(duì)油松離體胚不定芽誘導(dǎo)、增殖和生長(zhǎng)影響的研究本文研究發(fā)現(xiàn)氮、磷、鉀元素對(duì)油松離體胚三個(gè)培養(yǎng)階段(不定芽誘導(dǎo)、增殖、生長(zhǎng))影響的結(jié)論相同，即： 1.1氮源的兩種形態(tài)中，單獨(dú)使用NH4+-N對(duì)油松離體胚不定芽的誘導(dǎo)、增殖、生長(zhǎng)均有抑制作用，

3、而單獨(dú)使用NO3--N，不定芽的誘導(dǎo)、增殖、生長(zhǎng)狀況均良好，兩者混用效果最好。 1.2MS培養(yǎng)基中的磷素濃度偏低，不利于油松離體胚不定芽的誘導(dǎo)、增殖和生長(zhǎng)。 1.3鉀素在油松離體胚不定芽的誘導(dǎo)、增殖及生長(zhǎng)過(guò)程中的濃度適應(yīng)范圍均較廣。 1.4油松離體胚不定芽誘導(dǎo)、增殖、生長(zhǎng)培養(yǎng)過(guò)程中，氮素形態(tài)配比和磷素、鉀素濃度的最佳組合均為：NO3-/NH4+比值為4、磷素濃度提高為MS培養(yǎng)基中磷素濃度的2倍、鉀素濃度為MS培養(yǎng)

4、基中鉀素濃度的1～4倍均可，但從節(jié)約培養(yǎng)藥品角度出發(fā)，鉀素濃度保持MS培養(yǎng)基中鉀素濃度不變。 在此改良的MS培養(yǎng)基上，不定芽出現(xiàn)時(shí)間早，誘導(dǎo)率高，不易形成愈傷組織，分化出的叢生芽數(shù)多且芽色濃綠，芽體生長(zhǎng)健壯，芽苗生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好。 2.培養(yǎng)基中氮、磷、鉀元素對(duì)不定根誘導(dǎo)的研究 2.1分別接種在1/2MS和改良MS培養(yǎng)基上的油松離體胚，盡管在不定芽的誘導(dǎo)、增殖、生長(zhǎng)及生根培養(yǎng)過(guò)程中的附加成分都相同，但最后只有在改

5、良MS培養(yǎng)基上的無(wú)根試管苗生出根來(lái)，說(shuō)明培養(yǎng)基中氮、磷、鉀元素對(duì)油松離體胚培養(yǎng)不定根的誘導(dǎo)有著重要影響。 2.2無(wú)根試管苗在含生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，必需轉(zhuǎn)入不含生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基，否則長(zhǎng)期生長(zhǎng)在含生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑培養(yǎng)基上的無(wú)根苗不但不能生根，而且基部逐漸出現(xiàn)愈傷組織，后期枯死。 2.3氮源的存在顯著抑制不定根的形成，培養(yǎng)基中糖/氮比值高時(shí)促進(jìn)試管苗的生根，而糖/氮比值低時(shí)抑制生根。培養(yǎng)基中添加3％蔗糖，不添加氮源