互葉白千層化學(xué)成分及分析方法研究.pdf

1、目的：以互葉白千層(Melaleuca alternefolia(Maiden et Betehe) Chee1)為研究對(duì)象，分離分析其石油醚提取部位和乙酸乙酯提取部位的化學(xué)成分，并利用GC-MS-DS技術(shù)對(duì)互葉白千層脂溶性成分進(jìn)行了成分的定性分析。在化學(xué)研究的基礎(chǔ)上，選擇槲皮素和山奈酚作為含量測(cè)定指標(biāo)，建立了同時(shí)測(cè)定互葉白千層槲皮素和山奈酚的HPLC分析方法，為互葉白千層的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供方法和依據(jù)。本研究對(duì)進(jìn)一步合理開發(fā)和利用該植物

2、資源具有重大的意義。
　　方法：互葉白千層枝葉用95％乙醇回流法提取得到乙醇總提取物，用系統(tǒng)溶劑分離法分得其極性不同的石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和水溶性部位；采用硅膠吸附色譜法、低壓硅膠柱層析、重結(jié)晶法等現(xiàn)代分離方法和技術(shù)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分離和純化，對(duì)分得的單體化合物利用理化檢驗(yàn)及UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等波譜方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；將互葉白千層石油醚部位經(jīng)柱層析分離得到5個(gè)油狀流份，以10%硫酸甲醇-正己

3、烷溶液進(jìn)行甲酯化處理后利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)分別對(duì)它們的脂溶性成分進(jìn)行分離和鑒定。采用薄層層析法(TLC)對(duì)互葉白千層中槲皮素和山奈酚進(jìn)行定性鑒別，并利用高效液相色譜外標(biāo)法同時(shí)測(cè)定互葉白千層中槲皮素和山奈酚的含量。
　　結(jié)果：從互葉白千層石油醚部位和乙酸乙酯部位分離得到12個(gè)化合物，鑒定了11個(gè)化合物，分別為：三十二醇(n-dotriacontanolⅡ)，三十四酸(n-gheddic acidⅢ)，β-谷甾醇(

4、β-sitosterolⅣ)，對(duì)香豆酸三十酯(melissyl esters of p-coumaric acidⅤ)，白樺脂酸(betulinic acidⅥ)，山奈酚(kaempferolⅦ)，膽甾-5-烯-3-醇(cholesterolⅧ)，沒食子酸乙酯(ethyl gallateⅨ)，原兒茶酸(protocatechuic acidⅩ)，槲皮素(quercetinⅪ)，沒食子酸(gallic acidⅫ)；采用GC-MS-DS對(duì)

5、互葉白千層石油醚部位的脂溶性成分進(jìn)行分離和鑒定，結(jié)果分離鑒定了其中的45個(gè)組分。互葉白千層中槲皮素和山奈酚分別在0.12-0.42μg，0.06-0.21μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為101.3%(RSD2.00%)，99.92%(RSD2.04%)；5個(gè)不同產(chǎn)地互葉白千層中槲皮素和山奈酚含量分別分布于2.39-5.15 mg/g，1.66-2.53 mg/g之間。
　　結(jié)論：從互葉白千層提取物中共分離鑒定了11個(gè)化合物

6、，其中，化合物Ⅴ通過檢索SciFinder Scholar數(shù)據(jù)庫，確定為新化合物，命名為對(duì)香豆酸三十酯，除化合物Ⅵ，其他10個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到，除化合物Ⅵ、Ⅳ、Ⅹ，其他8個(gè)化合物為首次從該屬植物中分離得到；采用GC-MS-DS對(duì)互葉白千層石油醚部位的脂溶性成分進(jìn)行分離和鑒定，鑒定了45個(gè)化學(xué)成分，為首次從該植物中分離鑒定。用TLC和HPLC法對(duì)互葉白千層定性、定量研究，建立了同時(shí)測(cè)定槲皮素和山奈酚的HPLC含量測(cè)定方法，本