N-花生四烯酸氨基乙醇對(duì)小鼠肝突觸小體攝取及肝片釋放去甲腎上腺素的影響.pdf

1、目的：
　　 1. 觀察突觸蛋白Synapsin在小鼠肝突觸小體與肝組織中的表達(dá)差異。
　　 2. 觀察不同濃度AEA對(duì)小鼠肝片釋放NE的影響。
　　 3. 觀察不同濃度AEA對(duì)小鼠離體肝突觸小體攝取NE的影響。
　　 方法：
　　 第一部分：利用密度梯度離心法制備小鼠肝突觸小體；采用Western-Blot 方法分別檢測(cè)肝突觸小體與肝組織中突觸蛋白Synapsin的表達(dá)。
　　 第二部分

2、：高效液相色譜－電化學(xué)方法檢測(cè)不同濃度AEA對(duì)肝片自發(fā)性和去極化時(shí)NE 釋放的影響。
　　 第三部分：高效液相色譜－電化學(xué)方法檢測(cè)不同濃度AEA對(duì)小鼠離體肝突觸小體攝取NE的影響。
　　 結(jié)果：
　　 第一部分：電鏡下可見(jiàn)離體肝突觸小體: 由完整質(zhì)膜包圍,其內(nèi)含有囊泡及神經(jīng)原纖維,并可見(jiàn)到類似突觸后膜的結(jié)構(gòu)。部分突觸小體出現(xiàn)空泡。突觸小體含量較高,常可見(jiàn)到游離的線粒體、微粒體及細(xì)胞突起的碎片；突觸蛋白Synaps

3、in在肝組織中的表達(dá)明顯比突觸小體中高。
　　 第二部分：隨著 AEA 濃度的增加(1-20 μmol/L)，AEA對(duì)肝片 NE 含鈣自發(fā)性釋放的抑制率(與對(duì)照組比較)逐漸下降并顯現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系;而對(duì)無(wú)鈣自發(fā)性釋放抑制率先降低后升高,最低為11.43％。對(duì)肝片NE 含鈣去極化釋放的抑制率先升高后降低,最高為39.17％。當(dāng)AEA 濃度達(dá)到20 μmol/L時(shí),對(duì)肝片NE的作用表現(xiàn)為刺激而不是抑制；對(duì)無(wú)鈣去極化釋放抑制率先升高后

4、降低,最高為85.29％。
　　 第三部分：隨著AEA 濃度從1 μmol/L 逐漸升高至10 μmol/L，肝突觸小體內(nèi)NE的含量減少27.81～70.79％，存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)；AEA 濃度繼續(xù)升高40 μmol/L時(shí),NE 含量不再繼續(xù)減少。
　　 結(jié)論：
　　 1. 突觸前膜特異性蛋白Synapsin在密度梯度離心法提取的突觸小體中的表達(dá)只占肝組織中的一部分。