花生四烯酸發(fā)酵工藝的研究.pdf

1、花生四烯酸(ARA)是人體的必須脂肪酸，具有多種重要的生理功能，因而具有廣泛的應(yīng)用前景。由于它來(lái)源匱乏，長(zhǎng)期以來(lái)其研究和應(yīng)用一直受到限制。利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。本論文利用一株用氮離子注入誘變選育的高山被孢霉作為生產(chǎn)菌株，對(duì)其發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸進(jìn)行了研究，包括以下幾個(gè)方面，一個(gè)適合實(shí)驗(yàn)室調(diào)控優(yōu)化的檢測(cè)方法的建立，種子培養(yǎng)基的確立和優(yōu)化，發(fā)酵條件和培養(yǎng)基組成的優(yōu)化，菌種對(duì)花生四烯酸產(chǎn)量的影響，前體和調(diào)節(jié)物對(duì)被

2、孢霉合成花生四烯酸的代謝調(diào)控。
　　 首先對(duì)花生四烯酸的檢測(cè)方法進(jìn)行了改進(jìn)，并對(duì)甲酯化條件進(jìn)行了優(yōu)化，大大提高了檢測(cè)效率，同時(shí)減少了有毒試劑的用量，建立了一個(gè)高效的ARA檢測(cè)方法。
　　 考察了培養(yǎng)基的組成，并進(jìn)行了優(yōu)化，確立最佳種子培養(yǎng)基配方為：葡萄糖2.5％、蛋白胨1.0％、酵母膏0.6％、花生蛋白粉1.2％；最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：葡萄糖12.0％、蛋白胨0.8％、酵母膏1.0％、花生蛋白粉0.8％。在此條件下實(shí)驗(yàn)得

3、到的花生四烯酸的產(chǎn)量是4.51g/L。
　　 通過研究菌種和發(fā)酵條件對(duì)ARA發(fā)酵的影響，確定了高山被孢霉生產(chǎn)ARA的最佳生產(chǎn)條件：斜面培養(yǎng)時(shí)間為7d；斜面培養(yǎng)溫度為28℃；斜面儲(chǔ)存時(shí)間為4℃下5d；接種量為10％，種齡為36h，發(fā)酵時(shí)間為8d，初始pH值為6.5，搖瓶轉(zhuǎn)速為180rpm，裝液量為80ml，發(fā)酵溫度為28℃。
　　 最后研究了玉米油和谷氨酸對(duì)花生四烯酸發(fā)酵的代謝調(diào)控，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在培養(yǎng)基中加入0.1％的谷